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目的: 探讨黄芩苷干预对子痫前期模型大鼠胎盘滋养细胞及血管内皮细胞Caspase-9表达的影响。 方法: 符合条件的60只健康清洁级Wistar大鼠,重约200g~220g,建立模型的依据是慢性一氧化氮合酶抑制模型。随机分为2组:对照组和子痫前期模型组,对照组15只,给予的药物是生理盐水,给药时间妊娠第13天,给药途径皮下注射;子痫前期模型组45只,药物是亚硝基左旋精氨酸甲酯125mg/(kg·d),给药时间妊娠第13天,给药途径皮下注射;子痫前期模型组造模成功以后,随机二次分组子痫前期对照组、低干预组和高干预组,每组15只。子痫前期对照组跟二次分组之前一样打药;低干预组,既要皮下注射造模药,又要在妊娠16天起腹腔注射黄芩苷50mg/(kg·d);高干预组,既要皮下注射造模药,又要在妊娠16天起腹腔注射黄芩苷100mg/(kg·d)。定时相同条件下测量大鼠尾动脉压及孕鼠24h尿蛋白。妊娠第21天进行剖宫取胎,无菌操作下留取完整胎盘组织,利用免疫组织化学方法检测胎盘组织中Caspase-9的表达,检测灰度值测其表达量,另取胎盘组织提取原代胎盘滋养细胞进行传代培养。 结果: 1.造模前测量对照组和子痫前期模型组大鼠尾动脉血压和24h尿蛋白进行比较,差异无统计学意义(P>0.05); 2.应用造模药物后第3天,子痫前期模型组与正常对照组比较,测量大鼠尾动脉收缩压[(135.47±5.44)VS(115.20±4.90)]、舒张压[(89.40±4.75)VS(79.93±7.82)]、平均动脉压[(104.76±4.36)VS(91.69±5.01)]均明显升高;24小时尿蛋白水平[(7.52±0.58)VS(6.24±0.26)]明显增多,差异具有统计学意义(P<0.05); 3.分别比较各组孕鼠在用黄芩苷干预4天后尾动脉血压、24h尿蛋白。 (1)比较低干预组和子痫前期对照组,大鼠尾动脉收缩压[(129.67±6.31)VS(144.60±5.32)]、舒张压[(82.93±7.41)VS(90.80±6.42)]、平均动脉压[(98.51±5.98)VS(108.73±5.68)]水平均下降,24小时尿蛋白[(9.96±0.26)VS(11.14±0.62)]含量减少,差异有统计学意义(P<0.05)。 (2)比较高干预组和子痫前期对照组,大鼠尾动脉收缩压[(132.67±4.20)VS(144.60±5.32)]、舒张压[(83.07±7.36)VS(90.80±6.42)]、平均动脉压[(99.60±5.81) VS(108.73±5.68)]下降明显,24小时尿蛋白[(9.92±0.23)VS(11.14±0.62)]明显减少,差异显著,有统计学意义(P<0.05); (3)高剂量黄芩苷干预组与低剂量黄芩苷干预组相比,大鼠尾动脉收缩压、舒张压、平均动脉压均有所下降,24h尿蛋白含量减少,差别是有统计学意义的(P<0.05)。 4.灰度值能够很好的反应各组孕鼠胎盘滋养细胞和血管内皮细胞中caspase-9表达。 (1)低剂量黄芩苷干预组与子痫前期对照组的比较,胎盘滋养细胞(190.85±1.24VS186.17±0.77)和血管内皮细胞中(191.85±1.14VS188.12±0.57) caspase-9的表达减少,差异有统计学意义(P<0.05); (2)高剂量黄芩苷干预组与子痫前期对照组的比较,胎盘滋养细胞(196.42±1.02VS186.17±0.77)和血管内皮细胞中(194.23±0.82VS188.12±0.57) caspase-9的表达明显减少,差异显著,有统计学意义(P<0.05); (3)高剂量黄芩苷干预组与低剂量黄芩苷干预组相比,胎盘滋养细胞和血管内皮细胞中caspase-9的表达减少,但差异无统计学意义(P>0.05)。 5.用胰酶和胶原酶消化方法提取大鼠胎盘滋养细胞进行细胞培养,细胞鉴定方法用的是免疫荧光方法,CK7表达与胎盘滋养细胞表面,没有观察到Vim表达。 结论: 1.本实验中造模是成功的。 2.黄芩苷可以使Caspase-9表达减少,阻断凋亡程序,减少胎盘滋养细胞和血管内皮细胞的凋亡起到治疗子痫前期的作用。