新型提取和分离技术的建立及其在中药质量控制中的应用

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中药中含有多种活性成分,这些复杂的活性成分表现出显著的药理活性作用。因此,高效地提取、分离中药中的活性化合物,并对中药进行质量控制是非常关键的。传统的提取和分离方法具有一定的局限性,比如有机溶剂用量大,提取效率低。本课题一直致力于开发绿色、高效地提取和高峰容量地分离中药中活性化合物的方法。1.建立了一种快速、高效、环保的基质固相分散微萃取技术,采用二极管阵列检测器超高效液相色谱法测定郁金中萜类化合物的含量。以葫芦脲为吸附剂,研磨时间为149 s,3-(N,N-二甲基十六胺)丙烯磺酸盐水溶液(p H=6.5)为洗脱溶剂,得到了最佳洗脱条件。结果表明,在0.1和1.0μg/m L加标水平下,样品的加标回收率为96.53-104.60%。此外,本方法重现性良好(RSD≤3.66%)。2.建立了高效的全二维液相(LC×LC)-四极杆飞行时间质谱(Q-TOF/MS)联用测定菊花中19种有效成分的方法。优化了色谱柱、流速和梯度的分离条件。将建立的方法应用于所有菊花样品中19种分析物的含量测定。基于这些菊花成分含量的数据集,采用主成分分析(PCA)、偏最小二乘判别分析(PLS-DA)和聚类分析(HCA)对不同品种的菊花进行区分。选取的26个菊花产品被分为5大类,其中滁菊、金盏菊、胎菊和万寿菊各自聚为一类。杭白菊、黄菊、贡菊和雪菊因其分析物含量相似而聚在一起。3.采用超高效液相色谱(UHPLC)-Q-TOF/MS联用技术,建立了一种简单的离子液体双水相辅助机械化学萃取的方法检测玫瑰中的多种活性成分。以离子液体兼顾机械化学萃取的固体反应剂和离子液体双水相萃取的离子液体相。在最终优化条件下,该方法线性良好,相关系数为0.9963-0.9996。4个分析物的检测限在0.05-0.08 ng/m L之间。在0.1和1μg/m L的加标水平下,玫瑰样品的加标回收率为84-119%,这说明该方法的精密度是可接受的。4.首次提出了基于离子液囊泡的机械化学辅助提取法(MCAE),并成功地应用于桑葚中弱酸类化合物的提取。在囊泡体积为300μL、研磨时间为7.5min、固液比为200 mg/m L的最佳条件下,MCAE对弱酸性化合物的提取率最高。通过扫描电镜、透射电镜观察囊泡的形成及理化性质的变化。这些变化主要包括细胞壁破坏导致的分析物向囊泡溶液转移的现象,增强了分析物的扩散和溶解性。该方法线性良好,相关系数(r~2)大于0.9993,检测限为3.98-13.89 ng/m L,回收率为84-122%,重现性良好,相对标准偏差(RSD)在4.78%以下。
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