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目的:子宫内膜癌(endometrial carcinoma, EC)是女性生殖系统常见的一种恶性肿瘤,它的发生、发展是一个多因素、多步骤的复杂过程。原癌基因的激活,抑癌基因的失活、突变、抗细胞凋亡等不同的机制都可能参与其中。一般认为子宫内膜增生-不典型增生-癌是子宫内膜腺癌癌变的经典过程。子宫内膜增生,特别是不典型增生是子宫内膜癌的重要癌前病变。研究子宫内膜癌的癌变对子宫内膜癌的防治具有重要意义。EZH2基因是1996年发现的一种新的人类基因,定位于人染色体7q35。EZH2基因是果蝇E(z)基因的同源基因,与细胞生长调节相关,通过抑制染色质中的靶基因因而促进细胞增殖。pRb-E2F通路在细胞增殖和肿瘤形成过程中起重要作用。EZH2位于pRb-E2F通路的下游,由于去磷酸化的pRb能够结合E2F,抑制E2F启动S期的基因转录,pRb-E2F复合物结合于EZH2启动子结合位点,抑制EZH2启动子的转录。下调EZH2表达显著性地抑制了细胞生长,阻滞细胞于G2/M期。通过原位杂交技术,发现EZH2在多种肿瘤中基因扩增,认为EZH2是一候选癌基因。EZH2作为转录抑制因子,在基因水平上抑制多种基因的活性,尤其明显抑制肿瘤转移抑制基因,表现为EZH2蛋白促进肿瘤细胞的侵袭转移。p130是一个典型的抑癌基因,属Rb基因家族。p16基因又称为多种癌抑制因子,是肿瘤抑制基因。生理状态下p130和p16通过对转录因子(E2Fs)的活性调节而影响EZH2的转录。p130和p16的表达抑制了E2F的活性以及后来细胞周期的阻滞。研究表明,EZH2异常表达与白血病的发生、前列腺癌的转移有关。迄今为止,有关EZH2在子宫内膜癌变过程中的表达及意义的研究工作尚未见文献报道。为探讨EZH2在子宫内膜癌的发生、发展的作用及其与p130和p16的表达相互关系,本研究对正常增殖期子宫内膜、子宫内膜单纯性增生、复杂性增生、不典型增生和子宫内膜癌组织中EZH2、p130和p16在蛋白水平上的表达情况进行了免疫组化分析。方法:应用免疫组织化学(Immunohistochemistry,IHC)法检测20例增殖期宫内膜、20例单纯性增生、20例复杂性增生、20例不典型增生和43例子宫内膜腺癌组织中EZH2、p130、p16的表达与临床病理特征的关系及三者之间相互作用关系。结果:1 EZH2在不同性质子宫内膜组织中的表达EZH2基因蛋白阳性反应主要定位于细胞核,在正常组织间质细胞中也有EZH2蛋白的表达。在增殖期宫内膜、子宫内膜单纯性增生、复杂性增生、不典型增生和子宫内膜腺癌中阳性表达率分别为15.0%、30.0%、40.0%、55.0%、74.4%。EZH2在子宫内膜腺癌中的表达显著高于正常增殖期宫内膜、子宫内膜单纯性增生和复杂性增生(P<0.05)。在子宫内膜腺癌中, G1级组织中EZH2蛋白阳性表达显著高于G2+G3级组织(P<0.05)。2 p130在不同性质子宫内膜组织中的表达p130为胞核阳性表达,呈棕黄色或棕褐色颗粒状。p130在20例增殖期宫内膜中有18例(90.0%)阳性表达,在20例子宫内膜单纯性增生中有16例(80.0%)阳性表达,在20例复杂性增生中有14例(70.0%)阳性表达,在20例不典型增生中有11例(55.0%)及在43例子宫内膜腺癌中有21例(48.8%)阳性表达; p130蛋白的表达逐渐降低,差异有显著性(P<0.05)。p130蛋白在子宫内膜腺癌中的表达显著高于正常增殖期宫内膜、子宫内膜单纯性增生(P<0.05)。在子宫内膜腺癌中,p130蛋白的表达与组织学分级有关,G2+G3级组织中p130蛋白阳性表达率显著低于G1级组织(P<0.05),而与其他临床病例参数无关(P>0.05)。3 p16在不同性质子宫内膜组织中的表达p16阳性表达位于细胞核或/和细胞浆,呈棕黄色颗粒。从增殖期宫内膜→子宫内膜单纯性增生→复杂性增生→不典型增生→子宫内膜腺癌癌变的过程中,p16蛋白的阳性表达率逐渐降低(90.0%、70.0%、70.0%、50.0%、46.5%)。p16蛋白在子宫内膜腺癌中的表达显著高于正常增殖期宫内膜(P<0.05)。在子宫内膜腺癌中,p16蛋白的表达与组织学分级有关,G2+G3级组织中p16蛋白阳性表达率显著低于G1级组织(P<0.05),p16蛋白在有淋巴结转移者中的阳性表达率显著低于无淋巴结转移者(P<0.05)。4 EZH2、p130及p16在子宫内膜癌变过程中的表达情况的相关性研究EZH2蛋白呈阳性表达的60例中有30例p130蛋白阳性表达,30例阴性表达;EZH2蛋白呈阴性表的63例中有50例p130蛋白阳性表达,13例阴性表达。统计学分析结果表明,在子宫内膜癌变过程中EZH2与p130表达呈负相关(χ2=11.560,P<0.05)。EZH2蛋白呈阳性表达的60例中有27例p16蛋白阳性表达,33例阴性表达;EZH2蛋白呈阴性表的63例中有49例p16蛋白阳性表达,14例阴性表达。EZH2与p16在子宫内膜癌变过程中的表达呈负相关(χ~2=13.871,P<0.05)。p130蛋白呈阳性表达的80例中有62例p16蛋白阳性表达,18例阴性表达;p130蛋白呈阴性表的43例中有14例p16蛋白阳性表达,29例阴性表达。根据本实验的结果,表明p130与p16在子宫内膜癌变的表达中呈正相关关系(χ~2=23.731,P<0.05)。结论1从增殖期宫内膜、子宫内膜单纯性增生、复杂性增生、不典型增生到子宫内膜腺癌,EZH2在蛋白水平上的表达逐级增高,而p130和p16蛋白的表达逐渐下降,提示在蛋白水平上EZH2表达上调和p130及p16表达下调可能是子宫内膜癌癌变的重要机制。2子宫内膜癌组织中,EZH2和p130的阳性表达与组织学分级密切相关,p16的阳性表达与组织学分级和有无淋巴结转移密切相关。说明EZH2、p130和p16均与子宫内膜癌的进展有关,可作为子宫内膜癌的恶性程度判断的一个标志。3子宫内膜癌变过程中EZH2的阳性表达与p130和p16的阳性表达呈负相关。p130和p16在子宫内膜癌癌变过程中的表达呈正相关。