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磷脂是一种天然的生物表面活性剂,广泛分布于动植物界。磷脂中主要含有磷脂酰胆碱(PC)以及少量的磷脂酰乙醇胺(PE)、磷脂酰肌醇(PI)、溶血磷脂酰乙醇胺(LPE)、鞘磷脂(SM)、溶血磷脂酰胆碱(LPC)、棕榈酸甘油酯(TG)、胆固醇(CH)等组分。它们是动植物中细胞膜、核膜、质体膜的基本成分,也是生命的基础物质之一,具有重要的营养和医用价值,广泛应用于医药、食品、化工等领域。由于组分复杂与缺少紫外吸收,磷脂类药品与辅料的质量控制一直以来是药物分析的研究热点与难点。本论文分别采用高效液相色谱-蒸发光散射检测法和超临界流体色谱法分离并定量测定了以猪肺磷脂注射液(商品名：固尔苏)为代表的磷脂类药品和以蛋黄卵磷脂、大豆磷脂为代表的磷脂类辅料中各磷脂组分,为其质量控制提供技术手段和参考依据,论文内容主要包括以下两个部分：(1)首次建立了高效液相色谱-蒸发光散射检测法分离并测定固尔苏中9种磷脂组分。与固尔苏现行进口药品注册标准中采用双向薄层色谱法分离后仅测定PC含量的方法相比,该方法操作简便、稳定、重现性好,能够提供多种磷脂的检验数据,更适用于控制企业批间产品的一致性。在色谱条件优化过程中,考察了二醇柱、氨基柱以及不同产家硅胶柱对固尔苏中各磷脂的分离影响；并以氯仿-甲醇-水-氨水为洗脱系统,考察了流动相各组分比例改变、流速、柱温对固尔苏中各磷脂组分的分离影响。最终选择Kromasil硅胶柱(4.6mm×250mm,5 μm)为固定相,以氯仿：甲醇：水：氨水(78：21：0.2：0.4)为流动相A,氯仿：甲醇：水：氨水(59：35：5：0.4)为流动相B,梯度洗脱,柱温25℃,流速1.0ml/min,蒸发光检测器检测。使用该方法对同一厂家中2种不同规格的共5个不同批号的样品进行分析,5批固尔苏样品中均分离出9种已知磷脂和一种未知组分,对已知磷脂进行定量分析,以SM为对照计算未知组分的相对含量,并对该方法进行了重现性、线性、检测限以及回收率等方法学验证。结果表明,各磷脂组分分离完全,以对照品溶液浓度的对数值(lgc)对相应峰面积的对数值(lgA)做线性回归,9种磷脂的线性关系均良好,线性相关系数为0.9984～0.9995,日内精密度为0.81%～1.83%,日间精密度为0.74%～2.15%,检测限为4.1～106.5 ng,定量限为5.5～221.3 ng,回收率为98.5%～101.3%,5批固尔苏中各磷脂测定结果为：CH 0.10～0.13mg/ml,PE 2.62～2.93mg/ml, PI 3.51～3.62 mg/ml,PS 0.50～0.56 mg/ml,LPE 0.05～0.07 mg/ml,PC 68.51～72.42 mg/ml, SM 1.10～1.15 mg/ml,LPC 0.1～0.34 mg/ml,未知组分1.07～1.26 mg/ml。(2)首次建立了超临界流体色谱法分离并测定蛋黄卵磷脂和大豆磷脂中8种磷脂组分。该方法简便快速、专属性高,结果准确可靠,方法重复性好,使用的有机溶剂较少,减少了对人体的伤害,为磷脂的定量分析提供了新的检测技术和思路。实验中采用超临界流体色谱仪与蒸发光散射检测器联用,考察了硅胶柱(ZorbaxRx-SIL,3.0 mm×100mm,1.8μm)、硅胶柱(ZorbaxSilica,4.6mm×250mm,5μm)、氰基柱(Zorbax CN, 3.0 mm×100mm,1.8μm)、氨基柱(Zorbax NH2,4.6 mm×250mm,5μm)、苯基柱(Pursuit PFP,4.6 mm×150mm,5μm)和二醇柱(LiChrospher 100 Diol,4.0 mm×250mm,5um)对磷脂的分离影响,选择ZorbaxSilica柱(4.6mm×250mm,5μm)与LiChrospher 100 Diol柱(4mm×250mm,5μm)串联,同时考察了流动相中添加剂的种类以及组分比例、流速、柱温、蒸发光条件的改变对磷脂分离的影响。最终选择超临界流体二氧化碳(CO2)为流动相A,甲醇：氨水(100：0.5)为流动相B,进行梯度洗脱,柱温为30℃,流速为2.3 ml/min,蒸发光检测器检测。使用该方法对4家企业提供的共11批蛋黄卵磷脂和3家企业提供的共4批不同大豆磷脂进行分析,磷脂样品中分离出8种磷脂组分,对磷脂进行定量分析,并对该方法进行了重现性、线性、检测限以及回收率等方法学验证。结果表明,各磷脂组分色谱峰间的分离度为1.90-11.92,理论板数为3575-18786。以对照品溶液浓度的对数值(1gc)对相应峰面积的对数值(lgA)做线性回归,8种磷脂的线性关系均良好,线性相关系数为0.9967～0.9998,日内精密度为0.2%～2.0%,日间精密度为0.5%～2.0%,检测限为137～584 ng,定量限为273～1169 ng,回收率为97.1%～100.6%。11批蛋黄卵磷脂中各磷脂测得结果为：TG 0.2%～1.8%,CH 0.4%～2.0%,PE 7.8～15.0%,LPE 0.7%～1.0%, PI 0.7%～1.8%,PC 68.0%～89.4%, SM 1.0%～1.9%, LPC0.6%～1.7%,4批大豆磷脂中各磷脂测得结果为：TG 0.1%～0.8%, CH 0.2%～0.3%, PE 5.0%～17.8%,LPE0.0%, PI 0.9%～1.6%,PC 53.6%～72.4%,SM0.0%,LPC 1.0%～2.9%。