密蒙花滴眼液对去势雄兔干眼结膜炎性因子IL-1β、黏蛋白5AC及P38MAPK表达的影响

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目的:观察不同浓度的密蒙花滴眼液对去势雄兔干眼结膜炎性因子IL-1β、黏蛋白5AC(MUC5AC)及P38MAPK表达的影响,从而探讨密蒙花滴眼液对干眼的疗效。方法:将36只雄兔随机分为:空白组(A)、模型组(B)、密蒙花滴眼液低(C,1mg/ml)、中(D,1.5mg/ml)、高(E,3mg/ml)浓度组、睾酮组(F)。除A组外各组切除双侧睾丸及附睾,术后8周,眼表检查显示造模成功,A、B组不予以处理,C、D、E组给予密蒙花不同浓度滴眼液,3次/d,F组按0.5ml/kg剂量在大腿肌肉处注射丙酸睾酮,每3天1次,各组实验用兔,分别于术前和用药4周后在全麻下各测量一次荧光素染色、SchirmerⅠ试验(SIT)和泪膜破裂时间(BUT)。用药观察4周后处死兔子,取其双眼球结膜组织,采用免疫组织化学染色法检测结膜中IL-1β、黏蛋白5AC、P38MAPK的表达,并进行统计学分析。结果:1.SIT、BUT、角膜荧光素染色:A组泪液分泌滤纸长度、泪膜破裂时间及荧光素染色前后比较无明显变化(P>0.05);B组去势后泪液分泌滤纸长度缩短、泪膜破裂时间明显低于其他组,角膜荧光素染色阳性,有显著性差异(P<0.01);C、D、E组用药后与B组比较,泪液分泌滤纸长度延长、泪膜破裂时间延长,角膜荧光素染色阳性改善,差异有显著性(P<0.01);D、E组泪液分泌滤纸长度较C组延长,泪膜破裂时间长于C组,差异有统计学意义(P<0.01)。2.结膜免疫组织化学染色IL-1β表达的结果:B组去势术后结膜中可见大量炎性细胞浸润,IL-1β有较强的阳性表达,与A、C、D、E、F组差异有统计学意义(P<0.01)。C、D、E组治疗后,炎症细胞较B组明显减少,但多于E组,与E组比较差异有统计学意义(P<0.05)。C组与D、E组比较,差异有统计学意义(P<0.05),D组与E组比较差异无统计学意义(P>0.05)。3.结膜免疫组织化学染色黏蛋白5AC表达的结果:造模后B组结膜中可见少量MUC5AC存在,与A、C、D、E、F组差异有统计学意义(P<0.01)。C、D、E组治疗后,MUC5AC表达量较B组明显增加;C组与D、E组比较,C组MUC5AC表达量低于D组和E组,差异有统计学意义(P<0.05),D组与E组比较差异无统计学意义(P>0.05)。D组、E组与F组比较,差异无统计学意义(P>0.05),但F组MUC5AC分泌量多于D、E组。4.结膜免疫组织化学染色P38MAPK表达的结果:与A比较,B组P38MAPK的阳性表达明显增加(P<0.01);C、D、E、F组与B组比较表达均明显减少,差异有显著统计学意义(P<0.01);C组与D、E、F比较,P38MAPK表达增加,有统计学意义(P<0.01);D组阳性表达率和E组比较无明显增加,差异无统计学意义(P>0.05);D组、E组与F组比较,差异有统计学意义(P<0.01);结论:采用双侧睾丸切除术,不同浓度的密蒙花滴眼液具有类雄激素效果,对于去势雄兔干眼可以增加泪液基础分泌量,稳定泪膜功能。不同浓度的密蒙花滴眼液可以下调干眼结膜组织中白介素-1β、P38MAPK的表达,增加干眼结膜中黏蛋白5AC的表达,从而减少干眼结膜组织的炎症浸润,增加干眼眼表黏蛋白的表达,维持泪膜稳定性,但其作用弱于雄激素。密蒙花滴眼液中、高浓度组作用强于低浓度组,高浓度组优于中浓度组。
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