多巴胺（dopamine,DA）调节动物体内许多重要的生理和行为,其作用依靠多巴胺受体（dopamine receptors,DARs）介导完成。昆虫DARs有两大类:D1样受体（Dop1-like）和D2样受体（Dop2-like）。大多数昆虫中Dop1-like有Dop1R1和Dop1R2两个亚型,Dop2-like只有Dop2一个亚型。本课题组前期在家蚕中鉴定克隆了2个Dop2-like基因（BmDop2R1和BmDop2R2）,BmDop2R2具有Dop2-like典型特征,当激活时能降低胞内c AMP水平。本文筛选了BmDop2R2的激动剂和拮抗剂,检测了家蚕雌蛾脑内DA含量及生殖器官中BmDop2R2表达情况,探究了BmDop2R2与BmDop2R1对产卵的影响及二者间的联系。研究结果如下:1.家蚕BmDop2R2的激动剂和拮抗剂筛选用5种潜在的激动剂和5种潜在的拮抗剂处理表达BmDop2R2的HEK293细胞,检测细胞内c AMP水平变化。在10μM的浓度下,除5-Me OT外的4种激动剂都显著降低胞内c AMP水平,降低c AMP水平的效果顺序为:DA=Bromoriptine>α-methylserotonin>6,7-ADTN>8-OH-DPAT。在10 n M的浓度下,除6,7-ADTN外,其余激动剂对胞内c AMP水平没有产生显著影响。在10μM的浓度下,5种拮抗剂中只有3种可以显著提升胞内c AMP水平,效果顺序为:chlorpromazine>spiperone>prazosin;在10 n M的浓度下,所有拮抗剂都不能使胞内c AMP水平显著升高。2.家蚕雌蛾DA含量与BmDop2R2的表达分析分析刚羽化、羽化后1h、交配后3h、拆对后2h、拆对后4h和拆对后8h等不同生殖时期皓月品系和皓月sch品系雌蛾头部DA含量,以及BmDop2R2在卵巢管、输卵管、黏腺和产卵器的表达。结果发现皓月雌蛾头部DA含量从刚羽化到羽化后1h变化很小,交配后3h陡然下降成峰谷,然后逐渐上升,到拆对后4h达顶峰,随后又开始下降;皓月sch雌蛾头部DA含量在羽化后1h比刚羽化时显著降低,在交配后3h升高至与刚羽化的含量相似,然后逐渐下降。DA含量在皓月和皓月sch两个品系雌蛾头部中都是先降低后升高,但皓月中的DA含量达到低谷和高峰的时间比皓月sch的晚,且始终是高于皓月sch的。两个品系在卵巢管和黏腺中BmDop2R2的表达变化趋势相似,卵巢管中表达是先升高后降低再升高又降低,不过皓月sch中变化比皓月早,幅度比皓月略小;黏腺中BmDop2R2表达是先降低后升高再降低又升高,变化幅度大,似乎皓月中的变化比皓月sch略早;输卵管和产卵器中BmDop2R2表达在拆对及以前是皓月中的比皓月sch中的高,拆对后是皓月sch中的比皓月中的高。这些显示两个品系的雌蛾生殖器中BmDop2R2的表达模式是有差异的,尤其输卵管和产卵器中的表达模式;雌蛾脑中DA含量与生殖器官中BmDop2R2表达间的变化趋势不显示一致性。3.BmDop2R2与BmDop2R1对产卵影响及二者联系的探究分别注射BmDop2R1与BmDop2R2的ds RNA及BmDop2R2的特异性拮抗剂到羽化前约24 h皓月雌蛹中,正常交配产卵后,分别统计雌蛾产卵情况。与EGFP对照组相比,干涉BmDop2R1或BmDop2R2后,家蚕产卵速率与产卵总数都有显著下降,遗腹卵数有所上升,受精率没有显著变化。干涉BmDop2R1和干涉BmDop2R2对产卵速率、产卵总数、受精率和遗腹卵数等的影响比较接近。与PBS对照组相比,注射BmDop2R2拮抗后,产卵速率与产卵总数也都有显著下降,遗腹卵数有所上升,受精率没有显著变化。双分子荧光互补实验显示BmDop2R1和BmDop2R2不能形成复合物。BmDop2R1和BmDop2R2都能调控雌蛾的产卵,但它们不是通过结合成复合物的形式发挥效用。