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目的:研究重组人生长激素(rhGH)对生长激素受体(GHR)不同表达状态的荷人胃癌裸鼠移植瘤生长及血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。
方法:取60只雄性裸鼠进行实验,通过免疫细胞化学染色法检测胃癌细胞株SGC-7901及MKN-45生长激素受体(GHR)的表达状况,并将两株细胞分别接种于4只裸鼠皮下,制作裸鼠胃癌皮下移植瘤模型,3周后取出移植瘤制成组织匀浆,接种于另外52只裸鼠。依据接种细胞种类的不同,进一步分别分为对照组(生理盐水,0.2ml/d),低剂量rhGH组(rhGH0.5 u·(kg·d)-1,0.2ml/d),高剂量rhGH组[(rhGH2.5 u·(kg·d)-1,0.2ml/d),连续给药14天,观察并记录裸鼠体质量和肿瘤体积变化,酶联免疫吸附法测定血清VEGF含量,免疫组织化学法检测胃癌组织中VEGF蛋白表达,RT-PCR检测胃癌组织VEGF mRNA水平变化,Western Blot法检测胃癌组织VEGF、p-STAT3及STAT3蛋白水平变化。
结果:人胃癌细胞株SGC-7901的GHR呈阳性表达(GHR+),细胞株MKN-45的GHR呈阴性表达(GHR)。对于接种GHR+的SGC-7901的裸鼠,连续给予14天rhGH后,高剂量rhGH组比低剂量rhGH组和对照组肿瘤体积增大明显(2.090cm3士0.256cm3 vs1.043cm3士0.257cm3,0.622cm3±0.149 cm3,均P<0.05),3组间裸鼠体质量差别不明显(22.56g±0.761gvs23.14g士0.493g,.22.50g士0.392g,均P>0.05)。裸鼠血清VEGF含量,与低剂量rhGH组和对照组相比,高剂量rhGH组血清中VEGF水平明显升高,差别具有统计学意义(252.94 pg/mL±15.32 pg/mLvs167.60 pg/mL±9.54 pg/mL,49.94 pg/mL±5.73 pg/mL,均P<0.05);肿瘤组织VEGF蛋白的表达,对照组VEGF表达呈中度阳性,低剂量rhGH组和高剂量rhGH组VEGF表达量高,呈强阳性;肿瘤组织VEGFmRNA表达水平,高剂量rhGH组VEGF相对表达量明显高于低剂量rhGH组和对照组,差别具有统计学意义(0.647a±0.0447vs0.412±0.0351,0.323a±0.0258,均P<0.05);VEGF和p-STAT3的蛋白表达在高剂量rhGH组明显高于低剂量rhGH组和对照组,差别具有统计学意义,其相对表达量分别为(1.557±0.048vs0.861±0.034,0.217±0.032,均P<0.05),和(1.160±0.027vs0.453±0.023,0.198±0.029,均P<0.05)。3组间总STAT3蛋白表达量没有明显差异(P>0.05)。而对于接种GHR MKN-45的裸鼠,连续给药14天后,高剂量rhGH组裸鼠体质量明显高于低剂量rhGH组和对照组(25.58g±0.405gvs24.47g±0.446g,22.78g±0.457g,均P<0.05),肿瘤体积大小、血清VEGF水平;肿瘤组织VEGF蛋白及mRNA表达,以及p-STAT3和总STAT3相对表达量,3组间差异均不具有统计学意义(P>0.05)。
结论:rhGH能促进GHR阳性表达的SGC-7901移植瘤生长,并促进VEGF、p-STAT3表达增高。对于GHR阴性的MKN-45移植瘤没有表现出明显的促肿瘤生长及促VEGF表达效应。GHR的存在极可能是rhGH影响VEGF分泌的关键靶点。