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目的:研究西达本胺(Chidamide)及丙戊酸钠(Valproic acid,VPA)对多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)细胞系U266、RPMI8226增殖及凋亡的影响;探索西达本胺及丙戊酸钠在抗多发性骨髓瘤(MM)细胞系U266、RPMI8226短期(6h)内对核因子-κB(Nuclear factor-kappa B,NF-κB)通路的作用。方法:西达本胺和丙戊酸钠对MM细胞的增殖及凋亡影响检测。不同浓度西达本胺和VPA分别处理U266和RPMI-8226细胞6h、48h,采用细胞增殖试剂盒(Cell counting kit 8,CCK-8)检测两种细胞系的细胞增殖情况;采用流式细胞术检测两种细胞系的细胞凋亡情况。西达本胺和丙戊酸钠抗MM细胞U266和RPMI8226短期内对NF-κB通路的作用研究。将U266、RPMI8226细胞经西达本胺、VPA分别处理不同时间0h、2h、4h、6h后,采用蛋白免疫印迹(Western blot)检测核因子-κB抑制因子(Inhibitor of nuclear factor-kappa B,IκB)、NF-κB p65、磷酸化κB抑制因子激酶(Phosphorylated inhibitior of kappa B kinase,P-IKK)蛋白分子的表达水平。结果:1.CCK-8检测细胞增殖情况不同浓度西达本胺(0.5μM、1μM、2μM、4μM、8μM)作用于U266细胞6h,细胞增殖抑制率分别为0.80±0.64、-0.04±0.51、0.09±3.19、1.26±0.95、0.55±0.48,各实验组与对照组比较均无统计学差异(p>0.05);作用48h细胞增殖抑制率分别为5.31±3.78、23.24±5.46、29.26±3.63、65.59±1.78、80.08±1.05,各实验组与对照组比较均有统计学差异(p<0.05)。不同浓度西达本胺(0.5μM、1μM、2μM、4μM、8μM)作用于RPMI8226细胞6h,细胞增殖抑制率分别为2.56±3.05、2.4±3.21、-2.06±4.9、0.81±1.54、-0.13±1.75,各实验组与对照组比较均无统计学差异(p>0.05);作用48h细胞增殖抑制率分别为11.25±6.76、26.63±6.00、43.84±4.33、66.37±2.17、83.19±1.94,各实验组与对照组比较均有统计学差异(p<0.05)。不同浓度VPA(0.5mM、1mM、2mM、4mM)作用于U266细胞6h,细胞增殖抑制率分别为-0.56±3.12、-0.26±0.57、-0.25±1.39、0.39±0.98,各实验组与对照组比较均无统计学差异(p>0.05);作用48h细胞增殖抑制率分别为7.64±5.02、35.85±3.61、80.69±1.20、95.87±0.53,各实验组与对照组比较,均有统计学差异(p<0.05)。不同浓度VPA(0.25mM、0.5mM、1mM、2mM、4mM)作用于RPMI8226细胞6h,细胞增殖抑制率分别为0.05±1.05、0.53±0.59、0.28±0.85、0.58±0.89、0.76±1.26,各实验组与对照组比较均无统计学差异(p>0.05);作用48h细胞增殖抑制率分别为28.27±3.57、46.10±2.51、67.14±3.13、83.92±0.17、92.18±0.66,各实验组与药物对照组比较均有统计学差异(p<0.05)。2.流式细胞术检测细胞凋亡情况不同浓度西达本胺(0μM、1μM、2μM、4μM、8μM)作用于U266细胞6h,细胞凋亡率分别为8.23±0.62、8.61±0.47、8.64±0.50、8.53±0.64、8.57±0.50,各实验组与对照组比较均无统计学差异(p>0.05);作用48h细胞凋亡率分别为9.77±2.25、15.01±3.72、17.57±3.11、21.58±3.01、32.50±4.32,西达本胺(2μM、4μM、8μM)组与对照组比较有统计学差异(p<0.05)。不同浓度西达本胺(0μM、1μM、2μM、4μM、8μM)作用于RPMI8226细胞6h,细胞凋亡率分别为8.20±0.50、8.50±0.20、8.16±0.88、8.23±0.10、8.36±0.40,各实验组与对照组组比较均无统计学差异(p>0.05);作用48h细胞凋亡率分别为8.98±0.91、13.05±0.68、17.99±1.86、36.19±2.49、51.92±4.08,各实验组与对照组比较均有统计学差异(p<0.05)。不同浓度VPA(0mM、0.5mM、1mM、2mM、4mM)作用于U266细胞6h,细胞凋亡率分别为7.56±0.99、7.87±0.64、8.10±0.62、8.20±0.97、8.38±0.56,各实验组与对照组比较均无统计学差异(p>0.05);作用48h细胞凋亡率分别为10.81±3.4、18.93±3.25、30.04±5.85、61.32±13.81、63.25±12.82,VPA(1mM、2mM、4mM)组与对照组比较均有统计学差异(p<0.05)。不同浓度VPA(0mM、0.25mM、0.5mM、1mM、2mM)作用于RPMI8226细胞6h,细胞凋亡率分别为8.03±0.28、8.13±0.72、7.58±0.64、8.09±0.46、8.00±0.46,各实验组与对照组比较均无统计学差异(p>0.05);作用48h后细胞凋亡率分别为8.71±0.96、15.76±1.55、22.59±3.61、39.37±0.98、68.49±6.52,各实验组与对照组比较均有统计学差异(p<0.05)。3.蛋白免疫印迹检测西达本胺、VPA作用于U266、RPMI8226细胞短期内对NF-κB通路相关蛋白表达水平的影响单药西达本胺2μM、VPA 1mM分别作用于U266细胞0h、2h、4h、6h后,Western blot显示IκBα的表达水平随药物作用时间的延长而逐渐升高,相反NF-κB p65、P-IKKα/β的表达水平随药物作用时间的延长而逐渐降低。对于RPMI8226细胞,单药西达本胺2μM、VPA 0.5mM同样作用上述不同时间后,IκBα、NF-κB p65、P-IKKα/β蛋白分子的表达水平趋势与U266细胞的表达趋势一致。结论:1.西达本胺及VPA在短期内(6h)对MM细胞的增殖抑制及凋亡诱导作用不明显;但在48h能明显抑制MM细胞的增殖并促进细胞凋亡,且作用随药物浓度增加而增加。2.西达本胺及丙戊酸钠在短时间(2-6h)内即可通过抑制P-IKKα/β的表达,减少IκBα的磷酸化降解,从而下调NF-κB p65的表达水平发挥其阻滞MM细胞中NF-κB通路的作用。