复方土荆皮酊为土荆皮提取液和苯甲酸、水杨酸制成的中西药复方制剂,具有抗表皮真菌和止痒等作用,临床上常用于手癣、脚癣和体癣等的治疗,是医院常用的中西药复方制剂。目前该制剂标准中只有性状,鉴别,检查(乙醇量和微生物限度检查),总酸量测定内容,对处方中的土荆皮药材主要成分和苯甲酸、水杨酸各自的含量限度均没有作出明确的规定,不能有效反映复方土荆皮酊的内在质量。为了完善和提高该制剂的质量标准体系,本课题以复方土荆皮酊为研究对象,对其进行了4部分内容的研究,采用高效液相色谱法建立复方土荆皮酊中土荆皮药材的指标成分和主要西药化学成分的含量测定,采用一测多评法同步测定复方土荆皮酊中的4种二萜类成分,建立复方土荆皮酊的指纹图谱,并对其微生物限度检查方法进行验证,为准确全面的评价复方土荆皮酊的质量提供科学依据。本课题首先采用高效液相色谱法对复方土荆皮酊中土荆皮药材的主要成分土荆皮乙酸,化学成分苯甲酸和水杨酸的含量进行测定,建立该制剂中3种成分的含量测定方法。结果显示,土荆皮乙酸在1.29-25.78μg·ml-1(r=0.9998)、苯甲酸和水杨酸分别在22.18～266.16μg·ml-1(r=0.9999)和11.02～110.2μg·ml-1(r=0.9998)范围内线性关系良好；3种成分平均加样回收率(n=6)分别为100.4%(RSD=1.00%)100.9%(RSD=0.84%)和100.5%(RSD=0.75%)。该方法具有操作简便,结果准确,重复性好等特点,可用于复方土荆皮酊的质量控制。其次,本研究继续采用高效液相色谱法对复方土荆皮酊中土荆皮甲酸、土荆皮乙酸、土荆皮乙酸-O-β-D-葡萄糖苷和土荆皮丙酸4种二萜类化合物的含量进行测定,并采用一测多评法对复方土荆皮酊的质量进行评价。结果显示,土荆皮乙酸-O-β-D-葡萄糖苷在11.598-82.845μg·ml-1,土荆皮丙酸在1.206～27.009μg·ml-1,土荆皮乙酸在14.746～126.392μg·ml-1,土荆皮甲酸在0.159～2.274μg·ml-1范围内与峰面积呈现良好的线性关系；4种成分的平均加样回收率(n=6)分别为99.0%(RSD=0.29%),99.5%(RSD=0.15%),101.5%(RSD=0.17%)和99.1%(RSD=0.26%)。以土荆皮乙酸为内参物,建立其与土荆皮乙酸-O-β-D-葡萄糖苷、土荆皮丙酸和土荆皮甲酸的相对校正因子(分别是0.6814,1.2253和1.0650),利用该校正因子计算其他3种二萜类成分的含量,实现一测多评；同时与外标法的结果进行比较,验证一测多评法的准确性和可行性。结果表明,其计算值与实测值间无显著差异,实验所得的校正因子可信。建立的一测多评法同步测定复方土荆皮酊中4种二萜类成分的含量是可行的、准确的,可用于复方土荆皮酊的质量评价。再次,采用高效液相色谱法建立复方土荆皮酊的指纹图谱。以土荆皮乙酸为参照峰,确定了13个共有指纹峰,建立了对照指纹图谱,并计算14批次复方土荆皮酊指纹图谱相似度。该方法的精密度、重复性、稳定性良好,为复方土荆皮酊的质量控制提供了必要的补充。最后,根据中国药典2010年版规定,对复方土荆皮酊的微生物限度检查方法进行验证,建立其微生物限度检查方法。结果表明可采用薄膜过滤法进行细菌计数,采用培养基稀释法进行霉菌计数,采用薄膜过滤法进行控制菌检查。建立的方法可有效去除复方土荆皮酊的抑菌活性,达到准确检出的目的,可用于复方土荆皮酊的质量控制。