电针对大鼠脊髓损伤后Notch1蛋白表达的影响的实验研究

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[目的]脊髓损伤(SCI)是中枢神经系统最严重的损伤,其损伤后神经及胶质再生修复机制至今尚未明了。神经干细胞(NSC)移植是目前治疗SCI的有效策略,但外源性NSC移植存在成瘤性、异向分化、组织相容性等问题。电针作为一种中医治疗手段在治疗脊髓损伤中的效果已得到肯定,而Notch信号通路在神经干细胞(NSC)增殖、分化过程中起重要作用。本实验通过使用动脉瘤夹钳夹造成钳夹型SD大鼠脊髓损伤(SCI)模型,研究电针治疗SD大鼠脊髓损伤后Notch1蛋白表达的情况,探究电针治疗脊髓损伤是否通过Notch信号通路产生作用。[方法]1.本实验随机将120只SD大鼠随机分成脊髓损伤组(45只)、电针治疗组(45只)与假手术组(30只)。建立SD大鼠脊髓T10节段钳夹脊髓损伤模型,假手术组SD大鼠仅咬除T10节段两侧椎板,不损伤脊髓;电针治疗组于术后第3天开始采取电针治疗;建模后1d、3d、5d、7d、14d、21d、28d分别进行BBB行为学评分,评估神经功能恢复情况。2.各组分别于损伤后7d、14d、21d、28d进行脊髓组织取材,做免疫组化、蛋白印迹分析,测定损伤后局部脊髓组织的Notchl蛋白的表达及内源性干细胞增殖情况。3.运用SPSS Statistics17.0统计学软件进行分析,各组组数据及比值均数比较采用配对样本t检验,以α=0.05作为检验标准。[结果]1.BBB评分结果提示,假手术组明显高于损伤组;每组数据随着术后时间的增长逐渐增高;同一组内不同时间点有明显差别(P<0.05)。同一时间点不同组间比较有明显差别(P<0.05)。2.同一时间点不同组之间,内源性神经干细胞数目比较,电针组明显高于其他组;各组之间的对比有显著差异(P<0.05)。电针组之间不同时间点对比,随着电针时间的延长,细胞数不断增长;不同时间点之间的对比有显著差异(P<0.05)。3.同一时间点不同组之间,电针组Notch1蛋白的表达明显低于损伤组;电针、损伤组与假手术组之间的对比有显著差异(P<0.05)。电针组之间不同时间点对比,随着电针时间的增长,Notch1蛋白表达越低;不同时间点之间的对比有显著差异(P<0.05)。[结论]1.电针治疗后明显可以提高BBB行为学评分,从行为学角度上可以解释为电针治疗对脊髓损伤有明显治疗效果。2.电针能促使大鼠脊髓损伤后损伤点远端内源性神经干细胞的增殖。3.电针能够抑制脊髓损伤后Notch1蛋白的表达。4.电针可能通过抑制脊髓损伤后Notch1的表达而消除神经干细胞向胶质细胞分化的信号分子。
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