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第一部分：维生素C对人胶质瘤SHG44细胞的影响作用目的：通过培养人胶质瘤SHG44细胞,然后采用不同浓度维生素C处理SHG44细胞,用顺铂处理SHG44细胞作为阳性对照组,观察维生素C对SHG44细胞增殖、凋亡的影响,以及对细胞中HIF-1α和VEGFmRNA表达水平的影响。探讨维生素C对SHG44细胞的可能作用机制。方法：通过培养人胶质瘤SHG44细胞,将不同浓度维生素C(0、0.5、1.0、2.0、4.0、8.0、10.0mmol/L)作用于处于对数生长期的SHG44细胞,MTT比色法检测细胞的IC50值；然后将不同浓度维生素C(0.0.5、0.75、1.0、1.25、1.5、1.75、2.0mmol/L)和顺铂(20mg/L)作用于处于对数生长期的SHG44细胞,采用MTT法检测细胞的生长抑制率；将维生素C (0、1.5mmol/L)和顺铂(20mg/L)作用于处于对数生长期的SHG44细胞24小时,采用流式细胞仪检测细胞周期和凋亡,用RT-PCR法检测SHG44细胞中HIF-1α和、EGFmRNA的相对表达。结果：维生素C表现为浓度依赖性抑制SHG44细胞的生长。在570nm波长,维生素C作用24小时后,其IC50值为1.695mmol/L;当维生素C的浓度大于1.25mmol/L,并作用SHG44细胞48小时后细胞出现明显的增殖抑制并大量死亡；维生素C和顺铂对SHG44细胞的处理都使得细胞的早期凋亡较空白对照组显著增加(P<0.05)。维生素C和顺铂的处理都使得S期的SHG44细胞较空白对照组减少(P<0.05)。与空白对照组相比,常氧条件下,维生素C和顺铂的处理都能升高SHG44细胞中HIF-1αmRNA的表达,和降低VEGF mRNA的表达(P<0.05)；维生素C组和顺铂组两组之间细胞中VEGFmRNA的表达其差异无统计学意义(P>0.05)。结论：维生素C能够抑制人胶质瘤SHG44细胞的增殖,并且促进细胞的凋亡。维生素C的作用机制可能跟降低细胞中VEGF mRNA的表达,抑制组织细胞的血管生成有关。第二部分：维生素C对裸鼠皮下移植瘤的影响作用目的：通过构建人胶质瘤SHG44细胞BALB/c型裸鼠皮下移植瘤模型。采用顺铂作为阳性对照组,观察不同剂量的维生素C对裸鼠皮下移植瘤的生长抑制作用。以及对移植瘤组织细胞中HIF-1α和VEGFmRNA表达的影响。分析维生素C对胶质瘤的潜在作用机制,为胶质瘤的治疗提供实验室依据。方法：1、培养人胶质瘤SHG44细胞并进行传代。然后采用处于对数生长期的细胞,吹打制成密度为2×107个/ml的单细胞悬液。抽取0.2m1注射入裸鼠皮下(背部右前肢外侧)。在接种后2周检查,接种部位皮下长出包块,测量移植瘤体积,大约为100mm3,判定胶质瘤模型制作成功。2、将4-5周龄的雌性裸鼠28只随机分为4组,每组7只。空白对照组给予生理盐水,0.4ml/只,腹腔注射,每两天一次,共3周；维生素C低、高剂量组分别给予2g/kg、4g/kg每只,腹腔注射,每两天一次,共3周；顺铂组则给予顺铂2g/kg,腹腔注射给药,每两天一次,共3周。在用药结束后第二天处死各实验组小鼠,并计算肿瘤体积以及抑瘤率。采用RT-PCR法检测各实验组肿瘤组织细胞中HIF-1α和VEGFmRNA的表达情况。结果：1、成功建立了裸鼠皮下移植瘤模型,肿瘤种植的成功率较高,达100%。2、维生素C可以抑制裸鼠皮下移植瘤组织的生长,且高剂量组对肿瘤的抑瘤率其结果要大于低剂量组。各实验组的肿瘤体积跟空白对照组相比具有统计学上的差异(P<0.05)。3、维生素C低、高剂量组都能够降低两种因子的表达,并且高剂量组降低得更明显,与空白组相比,其差异都具有统计学意义(P<0.05)。维生素C低、高剂量组和顺铂组比较,其差异有统计学意义(P<0.05)。结论：人胶质瘤SHG44细胞建立裸鼠皮下移植瘤模型确实可靠,可以用于胶质瘤的预防以及治疗的实验性研究；在一定剂量范围内的大剂量维生素C可以抑制裸鼠皮下移植瘤的生长,表现出一定的抗肿瘤作用。其机制可能跟维生素C抑制组织细胞中HIF-1α和VEGFmRNA的表达,降低肿瘤组织的血供相关。图14幅,表1个,