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背景：
脓毒症可激活先天免疫系统，引发一系列生理变化，最终影响中枢神经系统,激活小胶质细胞，介导炎症损害，进一步导致认知功能障碍。越来越多的证据表明，代谢重编程在小胶质细胞活化和炎症反应的调节中起着重要作用。当受到炎症(如LPS)刺激时，小胶质细胞从氧化代谢转变为糖酵解代谢，向M1型极化。用IL-4刺激小胶质细胞时，葡萄糖的消耗和乳酸的产生减少，细胞向M2型极化。近年来有研究发现，在动物炎症模型中使用选择性α2-肾上腺素受体激动剂右美托咪定有抗炎作用和脏器保护作用。
目的：
1.探究小鼠盲肠结扎穿孔术(CLP)后3个阶段(24小时、7天、23天)海马组织的炎症因子、突触蛋白、小胶质细胞极化标志分子、糖脂代谢相关分子表达的变化。
2.探究右美托咪定对小鼠CLP术后24小时海马组织的炎症因子、突触蛋白、小胶质细胞极化标志分子、糖脂代谢相关分子表达的影响。
方法：
1.8-12周的C57/BL6雄性小鼠被随机分成假手术组和手术组，手术组每组10-12只，假手术组每组4-6只，建立盲肠结扎穿孔术模型。建模后24小时、7天、23天取海马组织，应用QRT-PCR的方法检测组织中促炎因子TNF-α、IL-1β和抗炎因子IL-10的mRNA水平的变化。应用Westernblot的方法检测组织中突触蛋白SYN、PSD95、小胶质细胞M1型极化标志物iNOS、M2型极化标志物Ym1、糖酵解代谢调节分子PFKFB3、脂肪酸氧化代谢相关分子CPT1A蛋白水平的变化。
2.8-12周的C57/BL6雄性小鼠被随机分成假手术+盐水组、假手术+右美托咪定组、手术+盐水组、手术+右美托咪定组，手术组每组10-12只，假手术组每组4-6只，建立盲肠结扎穿孔术模型。给药组小鼠在术前12小时、术前1小时、术后1小时、术后6小时和术后12小时腹腔注射右美托咪定40ug/kg。建模后24小时取海马组织，应用QRT-PCR方法检测TNF-α、IL-1β和IL-10的mRNA水平，应用Westernblot方法检测SYN、PSD95、iNOS、Ym1、PFKFB3、CPT1A的蛋白水平，应用免疫荧光技术将M1型标志物CD16/32及M2型标志物CD206与PFKFB3共定位，研究小胶质细胞极化与糖酵解代谢的关系。
结果：
1.与假手术小鼠相比，脓毒症小鼠海马组织TNF-α、IL-1β、IL-10、Ym1在术后24小时、7天、23天表达显著升高(P<0.05)；iNOS、PFKFB3在术后24小时表达显著升高(P<0.05)；CPT1A在术后7天、23天表达显著升高(P<0.05)；SYN、PSD95在术后24小时、7天、23天表达显著降低(P<0.05)。从术后24小时至23天，脓毒症小鼠TNF-α、IL-1β、SYN、PSD95、iNOS、PFKFB3表达随时间显著降低(P<0.05)；IL-10、CPT1A表达显著升高(P<0.05)；Ym1表达先升高再降低(P<0.05)。
2.右美托咪定显著抑制脓毒症后24小时小鼠海马组织TNF-α、IL-1β、iNOS、PFKFB3表达(P<0.05)，上调IL-10、CPT1A、SYN、PSD95表达(P<0.05)。脓毒症小鼠海马CA1区CD16/32阳性M1型小胶质细胞PFKFB3荧光表达增强，右美托咪定显著抑制小胶质细胞PFKFB3荧光表达。
结论：
1.CLP术后24小时海马组织神经炎症增强，突触蛋白表达降低，小胶质细胞激活，糖酵解调节分子表达增强。术后7天和术后23天，神经炎症逐渐减弱，突触蛋白表达仍降低，小胶质细胞抗炎型极化增强，脂肪酸氧化相关分子表达增强。2.右美托咪定可以缓解CLP术后急性期海马神经炎症和小胶质细胞促炎极化，降低糖酵解调节分子的表达，升高脂肪酸氧化相关分子和突触蛋白的表达。
脓毒症可激活先天免疫系统，引发一系列生理变化，最终影响中枢神经系统,激活小胶质细胞，介导炎症损害，进一步导致认知功能障碍。越来越多的证据表明，代谢重编程在小胶质细胞活化和炎症反应的调节中起着重要作用。当受到炎症(如LPS)刺激时，小胶质细胞从氧化代谢转变为糖酵解代谢，向M1型极化。用IL-4刺激小胶质细胞时，葡萄糖的消耗和乳酸的产生减少，细胞向M2型极化。近年来有研究发现，在动物炎症模型中使用选择性α2-肾上腺素受体激动剂右美托咪定有抗炎作用和脏器保护作用。
目的：
1.探究小鼠盲肠结扎穿孔术(CLP)后3个阶段(24小时、7天、23天)海马组织的炎症因子、突触蛋白、小胶质细胞极化标志分子、糖脂代谢相关分子表达的变化。
2.探究右美托咪定对小鼠CLP术后24小时海马组织的炎症因子、突触蛋白、小胶质细胞极化标志分子、糖脂代谢相关分子表达的影响。
方法：
1.8-12周的C57/BL6雄性小鼠被随机分成假手术组和手术组，手术组每组10-12只，假手术组每组4-6只，建立盲肠结扎穿孔术模型。建模后24小时、7天、23天取海马组织，应用QRT-PCR的方法检测组织中促炎因子TNF-α、IL-1β和抗炎因子IL-10的mRNA水平的变化。应用Westernblot的方法检测组织中突触蛋白SYN、PSD95、小胶质细胞M1型极化标志物iNOS、M2型极化标志物Ym1、糖酵解代谢调节分子PFKFB3、脂肪酸氧化代谢相关分子CPT1A蛋白水平的变化。
2.8-12周的C57/BL6雄性小鼠被随机分成假手术+盐水组、假手术+右美托咪定组、手术+盐水组、手术+右美托咪定组，手术组每组10-12只，假手术组每组4-6只，建立盲肠结扎穿孔术模型。给药组小鼠在术前12小时、术前1小时、术后1小时、术后6小时和术后12小时腹腔注射右美托咪定40ug/kg。建模后24小时取海马组织，应用QRT-PCR方法检测TNF-α、IL-1β和IL-10的mRNA水平，应用Westernblot方法检测SYN、PSD95、iNOS、Ym1、PFKFB3、CPT1A的蛋白水平，应用免疫荧光技术将M1型标志物CD16/32及M2型标志物CD206与PFKFB3共定位，研究小胶质细胞极化与糖酵解代谢的关系。
结果：
1.与假手术小鼠相比，脓毒症小鼠海马组织TNF-α、IL-1β、IL-10、Ym1在术后24小时、7天、23天表达显著升高(P<0.05)；iNOS、PFKFB3在术后24小时表达显著升高(P<0.05)；CPT1A在术后7天、23天表达显著升高(P<0.05)；SYN、PSD95在术后24小时、7天、23天表达显著降低(P<0.05)。从术后24小时至23天，脓毒症小鼠TNF-α、IL-1β、SYN、PSD95、iNOS、PFKFB3表达随时间显著降低(P<0.05)；IL-10、CPT1A表达显著升高(P<0.05)；Ym1表达先升高再降低(P<0.05)。
2.右美托咪定显著抑制脓毒症后24小时小鼠海马组织TNF-α、IL-1β、iNOS、PFKFB3表达(P<0.05)，上调IL-10、CPT1A、SYN、PSD95表达(P<0.05)。脓毒症小鼠海马CA1区CD16/32阳性M1型小胶质细胞PFKFB3荧光表达增强，右美托咪定显著抑制小胶质细胞PFKFB3荧光表达。
结论：
1.CLP术后24小时海马组织神经炎症增强，突触蛋白表达降低，小胶质细胞激活，糖酵解调节分子表达增强。术后7天和术后23天，神经炎症逐渐减弱，突触蛋白表达仍降低，小胶质细胞抗炎型极化增强，脂肪酸氧化相关分子表达增强。2.右美托咪定可以缓解CLP术后急性期海马神经炎症和小胶质细胞促炎极化，降低糖酵解调节分子的表达，升高脂肪酸氧化相关分子和突触蛋白的表达。