江西烟草主要病害病原物种、生理小种及生化型鉴定

来源 :江西农业大学 | 被引量 : 4次 | 上传用户:JIMCZ
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目前危害江西烟草种植的病害种类众多,其中以烟草青枯病、烟草黑胫病、烟草病毒病危害最为严重。为了明确江西烟草主要病害病原的种类归属及生理分化,并继而为江西烟草抗病品种选育和利用提供理论依据,本实验采用cDNA反转录合成、聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR),目的基因片段克隆、核苷酸序列测定等分子生物学技术对江西烟草青枯病、烟草黑胫病、烟草普通花叶病毒病、黄瓜花叶病毒病和马铃薯Y病毒病病原物进行分子鉴定,并利用鉴别寄主、生物化学测定等方法对烟草青枯病菌、烟草黑胫病菌的生理小种及生化型进行鉴定,实验取得如下结果:(1)通过对16S rDNA基因全长核苷酸序列(1500bp)测定及序列同源性分析,明确了江西烟草青枯病病原为茄科雷尔氏菌(Ralstonia solanacearum);鉴别寄主接种和生化型测定结果表明,江西烟草青枯菌均属1号生理小种,在生化型划分上属生化型Ⅲ-1,推测认为江西烟草青枯病菌致病性差异不明显。(2)通过对rDNA-ITS测序(892bp)测定及序列同源性分析,将江西烟草黑胫病病原鉴定为疫霉菌属烟草专化性菌系(Phytophthora parasitica var. nicotianae);生理生化测定及鉴别寄主接种表明,供试的烟草黑胫病菌在生理小种划分上均属生理小种1号。(3)通过基因克隆和序列测定,分别获得江西烟草普通花叶病毒、黄瓜花叶病毒病毒和马铃薯Y病毒全长480bp、657bp和801bp CP基因序列,根据CP核苷酸序列同源性比对结果,认为CMV江西分离物属CMV亚组Ⅰ,PVY江西分离物在株系划分上为N株系。(4)系统发育树显示,江西烟草青枯病菌、烟草黑胫病菌、TMV、CMV和PVY在进化变异过程中受寄主选择作用不明显,而主要受地域发生的影响。
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