目的：　　 直至19世纪中叶,胃癌始终是导致全世界癌症死亡的最主要的原因[1]。尽管近几十年来胃癌的发病率有所下降,但其死亡率仍然居高不下,排在所有癌症死亡率的第二位[2]。对胃癌发生发展机制的研究尤其是对影响胃癌发生发展及侵袭转移过程的分子机制的研究已成为胃癌研究的重点。　　 微小RNA是存在于动植物中的一类高度保守的非编码小分子RNA。它们可以特异性的与靶基因mRNA的3’非翻译区发生互补结合,影响蛋白的翻译过程或使靶基因mRNA降解,以此对靶基因产生抑制作用[3-5]。近年来,在胃癌中发现许多微小RNA可能对胃癌产生作用,它们的差异表达与胃癌的发生发展、侵袭转移等过程有着显著的相关性[6-12]。　　 MicroR_NA-335表达下调与乳腺癌、肾上腺皮质癌及急性髓性白血病等多种癌症的发生有密切联系[13-15]。另有研究证明,低表达的miR-335与卵巢癌细胞发生耐药性有显著关系[16],它在乳腺癌中的异常表达还发挥了抑制乳腺癌转移的作用,可以通过抑制细胞转录因子SOX4,受体型酪氨酸蛋白磷酸酶N2,c-Mer原癌基因酪氨酸激酶和细胞外基质成分tcnascinC这些能够提高远处转移风险的基因表达来抑制乳腺癌细胞的侵袭能力[17]。目前,有关胃癌中miR-335的表达及其在胃癌中的作用的研究较少。因此,本研究旨在探讨在胃癌中miR-335的表达情况,并研究其在胃癌发生、发展过程中的作用及分子机制。　　 方法：　　 一、微小RNA-335在人胃细胞系及胃癌组织中的表达　　 1、利用实时定量PCR技术检测miR-335在胃细胞系中的表达。　　 2、利用实时定量PCR技术检测miR-335在胃癌及配对癌旁组织中的表达。　　 二、微小RNA-335影响胃癌细胞的侵袭转移　　 1、利用脂质体转染法将has-miR-335模拟物及面R-335抑制剂及其对应的阴性对照分别转入人胃癌SGC-7901、BGC-823和AGS细胞系。　　 2、利用Transwell侵袭实验检测差异表达的miR-335对胃癌细胞侵袭转移能力的影响。　　 3、动物实验检测miR-335高表达后在体内对SGC-7901细胞侵袭转移能力的影响。　　 三、微小RNA-335影响胃癌细胞侵袭转移的机制　　 1、利用生物信息学分析miR-335可能作用的靶基因及其作用位点。　　 2、利用荧光素酶报告基因检测miR-335在SGC-7901细胞中对其靶基因的调节作用。　　 3、利用WesternBlot对预测出的胃癌中miR-335可能作用的靶基因做蛋白水平上的验证。　　 结果：　　 一、微小RNA-335在人胃细胞系及胃癌组织中的表达　　 1、人胃癌细胞系中miR-335表达降低。　　 2、无淋巴转移的胃癌组织中miR-335表达显著升高。　　 3、胃癌组织中低表达的miR-335与淋巴转移、淋巴癌栓、不良T分期及不良N分期有明显的相关性。　　 二、微小RNA-335影响胃癌细胞的侵袭转移　　 1、构建差异表达miR-335的SGC-7901、BGC-823和AGS细胞系。　　 2、体外实验证明扣miR-335抑制胃癌细胞侵袭能力。　　 3、动物实验证明miR-335抑制胃癌细胞迁移能力。　　 三、微小RNA-335影响胃癌细胞侵袭转移的机制　　 1、生物信息学预测SPl和Bcl-w可能是miR-335作用于胃癌侵袭转移可能的靶基因。　　 2、双荧光素酶报告基因检测分析得出SP1和Bcl-w可能是胃癌中miR-335作用的靶基因。　　 3、WesternBlot实验证明胃癌细胞中高表达miR-335后SP1和Bcl-w蛋白表达显著降低。　　 结论：　　 1、胃癌细胞系中miR-335表达降低。　　 2、胃癌组织中miR-335表达与胃癌侵袭转移相关病理因素有显著相关性,miR-335表达量越低,胃癌侵袭越深、越容易发生淋巴转移。　　 3、过表达的miR-335抑制胃癌细胞侵袭转移能力。　　 4、miR-335可通过调节SP1和Bcl-w基因表达发挥抑制胃癌侵袭转移作用。