【摘 要】
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[目的]建立氟中毒和补钙干预的大鼠模型,对肾脏损伤及死亡受体相关通路基因和蛋白进行检测,探索不同水平钙对氟中毒大鼠肾脏损伤和凋亡的缓解机制。[方法]40只SD雄性大鼠随机分为四组:C组（普通饲料,蒸馏水）、F组（普通饲料,100 mg/L NaF水）、F+0.5%Ca组（普通饲料+0.5%CaCO3,100 mg/L NaF水）、F+1%Ca组（普通饲料+1%CaCO3,100 mg/L NaF水
【基金项目】
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国家自然科学基金项目（31972751）； 山西省自然基金项目（201901D111230）；
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[目的]建立氟中毒和补钙干预的大鼠模型,对肾脏损伤及死亡受体相关通路基因和蛋白进行检测,探索不同水平钙对氟中毒大鼠肾脏损伤和凋亡的缓解机制。[方法]40只SD雄性大鼠随机分为四组:C组（普通饲料,蒸馏水）、F组（普通饲料,100 mg/L NaF水）、F+0.5%Ca组（普通饲料+0.5%CaCO3,100 mg/L NaF水）、F+1%Ca组（普通饲料+1%CaCO3,100 mg/L NaF水）。试验120天后收集血液、肾脏样本。1.测定肾脏系数、血浆BUN水平、血清CRE和UA水平。2.HE染色观察肾脏形态。3.TUNEL法测定肾脏细胞凋亡。4.RT-PCR、Western-Blot和免疫组化等技术手段检测死亡受体通路中相关因子的基因和蛋白表达水平。[结果]1.F组的肾脏系数显著降低（p<0.05）;与F组相比,F+1%Ca组的肾脏系数显著增加（p<0.05）。CRE水平,BUN水平和UA水平发生明显变化,与C组相比,F组的CRE,BUN和UA显著增加（p<0.01）;与F组相比,F+0.5%Ca组和F+1%Ca组的上述三个指标均显著降低（p<0.05,p<0.01）。2.F组中,肾小管形成有脱落,具有肾小球萎缩的管型。与F组相比,F+0.5%Ca组和F+1%Ca组肾小球肿胀降低,补钙干预后肾小球的形态变得丰富,肾细胞逐渐排列,并且随着钙浓度的增加,损伤程度逐步降低。3.F组中肾脏细胞的凋亡数目显著增加（p<0.01）,F+1%Ca组中肾脏细胞的凋亡数目显著减少（p<0.05）。4.RT-PCR结果显示,与C组相比,在F组中,TRAIL、DR5、Fas、Fas-L、TNF、TNF-R1、TNF-R2、FADD、TRADD、Caspase 8、Caspase 3和PARP的mRNA表达水平均显著升高（p<0.05,p<0.01）,OPG表达量显著减少（p<0.01）。与F组相比,在F+0.5%Ca组和F+1%Ca组中,DR5和TNF-R1的mRNA表达量降低,OPG表达量升高,此外,TRAIL、Fas、Fas-L、TNF、TNF-R2、FADD、TRADD、caspase 8、caspase3和PARP的mRNA表达水平显著降低（p<0.05,p<0.01）。5.Western-Blot结果显示,与C组相比,F组中TRAIL、FAS、FAS-L、TNF、FADD、Caspase 8、Caspase和PARP的蛋白表达量显著增加（p<0.05,p<0.01）。与F组相比,F+0.5%Ca组和F+1%Ca组TRAIL、Fas、Fas-L、TNF、FADD、Caspase 8、Caspase 3和PARP表达显著降低（p<0.05,p<0.01）[结论]过量的氟导致大鼠肾脏形态和功能指标显著改变,通过死亡受体通路诱发肾脏凋亡,然而补充1%的钙可通过死亡受体通路（Fas、TNF、TRAIL途径）减轻氟诱导的肾损伤和凋亡。
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