铁皮石斛作为一种名贵的中草药,具有巨大的市场价值和观赏价值。然而,铁皮石斛在自然条件下生长条件苛刻,种子发芽率低,目前野生资源已将近枯竭。为了实现铁皮石斛产业的可持续发展,离体快繁技术对铁皮石斛的快速培育不可或缺。此外,各类种间形态差异不显著的石斛难以分辨,且不同种类、不同产地、不同年份的石斛质量良莠不齐,导致石斛市场以次充好等掺假行为的发生。基于这一背景,本论文主要从铁皮石斛离体快繁技术的优化与石斛快速鉴定体系的构建两方面进行展开。主要研究结果如下:(1)铁皮石斛离体快繁技术的优化通过离体快繁技术从基础培养基、有机添加物、生根壮苗激素配比三个方面对铁皮石斛培养基进行了优化,成功将铁皮石斛从萌发到出苗的生长时间从8个月缩短为了6个月,其培养的最优条件为B5+X+(20ml/L椰子汁+80g/L香蕉泥)+30g/L蔗糖+6.2 g/L琼脂,其中X指代激素,生根阶段为2 mg/L萘乙酸+0.5mg/L吲哚丁酸,壮苗阶段为0.5 mg/L萘乙酸+0.2mg/L吲哚丁酸。(2)石斛DNA条形码鉴定体系的构建实验选用两种植物常用DNA条形码基因——ITS2和psb A-trn H序列对包括铁皮石斛在内的9种石斛及其易混淆品的密花石豆兰共55个样本进行了系统进化树和遗传变异分析,并对这两种基因作为石斛鉴定条形码的可行性进行了探讨。结果显示,密花石豆兰与9种石斛的ITS2序列呈现出较大差异,在进化树上单独聚为了一个分支。此外,基于ITS2序列的石斛同属种内分歧最大值小于种间分歧的最小值,且平均种间分歧为平均种内分歧的58倍,表明了ITS2序列作为石斛鉴定条形码基因的适用性。而psb A-trn H序列只能作为ITS2的辅助序列而不能作为单独的条形码序列进行石斛鉴定分析。(3)石斛红外光谱鉴定体系的构建实验利用傅里叶变换红外光谱技术得到了铁皮石斛等9种石斛的特征光谱,并对石斛的基团和活性成分含量进行了分析,结果显示9种石斛的亲缘关系与DNA条形码结果基本一致。此外,对不同产地(浙江丽水、温州、台州和云南大理)铁皮石斛的红外光谱分析发现,4个产地铁皮石斛红外光谱在峰高上存在差异,且云南产地铁皮石斛谱图中部分峰发生了蓝移。因此,红外光谱法可以作为DNA条形码鉴定的辅助手段来建立石斛综合鉴定体系。