Ⅰ.小鼠ES细胞种系嵌合体的获得;Ⅱ.建立小鼠ES细胞nls-lacZ基因稳定标记的初步研究

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在该文的第一部分工作中,作者以三种本室新建自129/ter小鼠的ES细胞系MESPU21,MESPU22和MESPU29为供体细胞通过囊胚注射法和8细胞期桑椹胚注射法进行了嵌合体构建实验,受体胚胎分别来自近交系C57BL/6J及远交系白化小鼠KMW和ICR.共获得嵌合体81只,经毛色分析确定在进行测交42只嵌合体中有19只是种系传递者,为国内小鼠ES细胞种系嵌合体的首例报道.在该文的第二部分工作中,对利用ES细胞技术对两种高保真度基因策略进行进一步检验做了初步的探索.双重目的将是获得报告基因稳定标记的ES细胞系,进而经嵌合体途径获得报告基因全胚表达的小鼠模型.这样的标记细胞系和模型动物在细胞谱系分析、组织移植及在体遗传毒理研究等方面都有十分重要的应用价值.经过一系列载体构建过程,作者成功获得了EFlα-nls-lacZ融合基因的对照载体、HPRT定位整合载体和绝缘载体,并将部分载体转化ES细胞观察了EFlα-nls-lacZ基因的表达情况.这一初步研究为进一步探讨转基因高保真度表达策略及建立小鼠ES细胞的稳定遗传标记奠定了基础.
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