参麦注射液及其有效成分对药物代谢酶的影响

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细胞色素P450是重要的I相药物代谢酶系统,参与一系列亲脂性化合物的代谢,包括药物、致癌物及环境污染物的代谢转化。参麦注射液通过对肝脏P450酶的诱导或抑制可与其他药物产生相互作用。同时参麦注射液对心脏P450酶的调节作用,有助于发现其心血管治疗作用新的途径或靶点。本课题首先研究了参麦注射液对大鼠肝脏细胞色素P450酶的影响,采用超速离心法制备大鼠的肝微粒体,与探针药物共孵育,应用液相色谱-质谱(LC/MS)测定各同工酶特异性底物在大鼠肝微粒体的代谢产物的生成量,以此来测定各同工酶的酶活性。应用RT-PCR方法,检测参麦注射液对药物代谢酶mRNA表达的影响。结果显示:参麦注射液可增加CYP2B6、2C9酶活性,对CYP1A2、3A酶活性无明显影响;红参注射液对CYP1A2、2B6和2C9酶活性具有明显诱导作用,对CYP3A酶活性无影响;麦冬注射液能诱导CYP2C9酶活性。各处理组mRNA水平变化显示,参麦注射液能诱导CYP1A2、2B、2C的表达,红参注射液和麦冬注射液能诱导CYP2C的表达,红参注射液对CYP3A的表达无影响。参麦注射液对大鼠CYP2B、2C的诱导作用在酶活性水平和mRNA转录水平具有一致性,红参注射液对CYP3A在酶活性和mRNA水平都体现出抑制的趋势,麦冬注射液对CYP2C的诱导作用在酶活性及mRNA水平也均有体现。参麦注射液及其各单药对CYP450同工酶不同程度的诱导或抑制作用,提示当药物联合应用时应关注可能产生的药物间相互作用。参麦注射液对心脏组织P450酶mRNA表达水平检测显示:与空白组比较,除CYP2B1、CYP4A3和CYP4F6,参麦注射液对其他CYP各亚型mRNA的表达均表现了上调的作用,红参注射液组对CYP2E1、 CYP4A3、 CYP4F1和EHPX2mRNA表达有上调作用,麦冬注射液对ANP、BNP和EHPX2mRNA的表达上调作用明显,同时能显著下调CYP2B1和CYP2C11的表达。虽然参麦注射液对CYP2B1的作用没有统计学意义,但总体呈现出诱导的趋势,而麦冬注射液对CYP2B1呈现显著的抑制作用,提示红参注射液对CYP2B1的诱导作用更强。参麦注射液、红参注射液与麦冬注射液均对CYP2E1、CYP4F1和EHPX2有诱导作用,提示参麦注射液对CYP2E1、CYP4F1和EHPX2的诱导作用可能由复方中的红参和麦冬共同贡献。参麦注射液和麦冬注射液对ANP和BNP均具有诱导的作用,提示在对ANP和BNP的作用中麦冬比红参的作用更强。同时参麦注射液对心血管疾病疗效明确,可能与其对CYP2J3、ANP和BNP等调节作用较强相关。细胞实验水平得到了进一步的进一步的验证,参麦注射液对大鼠H9c2心肌细胞的CYP2J3、CYP2C11、ANP和BNP均具有明显的诱导趋势。为了更加全面的研究参麦注射液对P450酶的影响,选取麦冬中的有效成分麦冬皂苷D,并以执行心脏P450酶系统中执行重要生理功能的CYP2J3进行进一步研究。考察麦冬皂苷D对大鼠H9c2心肌细胞CYP2J3的影响,分别检测麦冬皂苷D作用细胞后CYP2J3mRNA、蛋白水平以及下游产物14-15EETs变化。结果显示:在,麦冬皂苷D对CYP2J3mRNA表达和蛋白表达均有明显的上调作用并呈现浓度依赖性(P<0.05),。ELISA实验检测显示麦冬皂苷D能增加大鼠H9c2心肌细胞中EETs的含量,提示麦冬皂苷D可能通过上调CYP2J3使心肌细胞中EETs的含量增加。综上所述,参麦注射液对大鼠肝脏、心脏CYP450酶各亚型显示了诱导或抑制的作用,当临床需要与其他药物联合应用时应密切关注,避免药物相互作用的发生。同时参麦注射液对心血管疾病产生治疗作用,可能与其对CYP2J3的调控密切相关,值得进一步深入研究。
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