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蛋白A免疫吸附柱是目前在自身免疫性疾病治疗中用量最大、治疗效果最好的血液净化吸附柱。但是蛋白A免疫吸附剂在30年的临床应用中仍存在一些弊端,譬如其与人IgG3结合力较弱,导致其对于系统性红斑狼疮、扩张性心肌炎等疾病治疗效果不显著。为了克服蛋白A吸附剂的上述缺陷,本论文将一段与人IgG3具有较强结合能力的蛋白G的基因与蛋白A的抗体结合结构域基因相连接,实现AG融合蛋白的原核重组表达,进而制备的融合蛋白AG吸附剂将弥补蛋白A吸附剂对IgG3结合力弱的不足,提高其对系统性红斑狼疮、扩张性心肌炎等疾病的治疗效果。本论文采用基因工程手段,选用大肠杆菌作为表达宿主菌,以含有蛋白A和蛋白G基因的质粒DNA为模板,成功克隆了全长为1470bp的包含编码蛋白A和蛋白G抗体结合结构域的DNA序列,并连接在表达载体pET23a上,构成重组质粒pET23a-CPAG,转化E.coli BL21(DE3)进行表达筛选,获得表达融合蛋白AG最适菌株E.coli BL21(DE3)(pET23a-CPAG)。所表达的融合蛋白AG仅含有抗体结合功能区,分子量约为54kDa。实验证实融合蛋白AG以可溶状态存在,并且与人IgG亲和活性良好。本论文采用加热沉淀和PEI沉淀等初分离技术、DEAE弱阴离子交换层析及IgG-Fc亲和层析等精分离技术对融合蛋白AG进行纯化。通过合理的选择与组合,最终确定相对较优的融合蛋白AG的分离纯化工艺。终产品经SDS-PAGE、高效液相分析,纯度达到98%以上,总回收率为60%。MALDI-TOF-MS测得分子量为54070.256Da,与理论计算值基本相符。本论文合成了以融合蛋白AG为配基的吸附剂,该吸附剂对血清中抗体的吸附效果与蛋白A吸附剂规律基本相同,但对IgG3的亲和力明显增强,且抗体结合量高于蛋白A吸附剂。配基密度为9.93mg/mL的吸附剂,对IgG的动态结合容量为35.9mg/mL gel,固定化融合蛋白AG与IgG的结合比例约为1：1.3,融合蛋白AG对人IgG的亲和常数为3.8×104L/mol,平衡解离常数为3.92mg/mL,最大理论结合容量为92.19mg/mL。融合蛋白AG既可以弥补蛋白A对于IgG3结合力弱的不足,又可以弥补蛋白G不结合其它类型免疫球蛋白的不足。将其固定于固相基质表面制成抗体亲和吸附剂,有潜力用于血液净化治疗包括系统性红斑狼疮、扩张性心肌炎在内的自身免疫性疾病。