温度对含氟碳液机器灌注保存供肝效果的影响

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目的:本实验通过对不同温度条件下含氟碳液机器灌注保存供肝效果的比较,探讨温度对含氟碳液机器灌注保存供肝效果的影响,为含氟碳液机器灌注保存供肝寻找最适温度。方法:雄性wistar大鼠30只,随机分成3组。对照组(10只):肝脏用4℃自制含氟碳液(配制方法见实验材料与方法)持续机器灌注保存8h,机器灌注流量为0.2ml·min-1·g-1。保存结束后行离体鼠肝循环再灌注(IPRL),灌注液为KH液,加入新鲜洗涤人红细胞(红细胞比容为15%),充100%纯氧,灌注速度为0.2ml·min-1·g-1,温度控制在37℃,时间为60min。实验组1(10只):肝脏用10℃自制含氟碳液灌注保存,其它条件同对照组,然后行IPRL,方法同对照组。实验组2(10只):肝脏灌注温度为16℃,其它保存条件与对照组相同,保存完成后行IPRL。各组于IPRL前在KH液中加入透明质酸(HA)300ng/ml,分别于再灌注10mmin、30min和60min时分别采集灌注流入液2ml和灌注流出液6ml,以测定丙氨酸转氨酶(ALT)、肿瘤坏死因子(TNF-α)含量和透明质酸(HA)摄取量,离体鼠肝循环再灌注结束后,取少许肝左中叶组织分别在光学显微镜和电镜下观察肝细胞及肝窦内皮细胞的形态学改变。结果:与对照组比较,实验组1和实验组2,ALT活性和TNF-α含量升高,HA摄取量下降,差异均有统计学意义(P<0.05)。实验组2与实验组1相比,ALT活性和TNF-α含量也升高,HA摄取量下降,差异均有统计学意义(P<0.05)。实验组1和实验组2肝细胞出现肿胀、空泡变性及点状坏死,肝窦内皮细胞肿胀、变性,肝窦结构破坏,实验组2重于实验组1。对照组明显轻于实验组,肝细胞和肝窦内皮细胞仅有轻度的水肿变性。结论:用自制氟碳液机器灌注保存供肝,在4℃、10℃、16℃三个温度段中,以4℃条件下保存效果最佳。
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