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肥城桃是中国水果名优特产，但其果实在采后难以贮存，容易腐烂。一氧化氮作为一种信号分子的重要性越来越受到关注。在水果保鲜方面，NO具有不可替代的功能。而可溶性鸟苷酸环化酶作为NO的受体，参与NO/cGMP信号转导调节，其研究意义不可小觑。因此开展肥城桃果实的分子生物学研究对其品质改良和遗传育种等方面有着重要的作用。本实验分为两部分，首先是对肥城桃中sGC基因的克隆及序列分析，根据氨基酸序列预测蛋白质三级结构，为进一步研究NO与sGC间的相互作用奠定了基础。第二部分，研究了NO对重组及提取sGC蛋白的影响。根据GenBank中已公布的番茄sGC基因保守序列设计兼并引物，从肥城桃中提取RNA，通过RACE方法，降落PCR及巢式PCR，克隆得到肥城桃sGC基因cDNA全长1527bp，其中编码区852bp，编码283个氨基酸，在GenBank中的登记号为CK700000。蛋白的分子量为31.7kDa，推测其等电点pI为4.84。sGC属于Guanylatecyc2super家族。蛋白比对发现，与其他物种的sGC蛋白相似，不含有已知的保守结构域，含有一个活性位点。同源性分析表明，sGC蛋白与拟南芥有较高的相似度，为69%。进化树分析表明，肥城桃sGC与大豆及苜蓿遗传距离最近。RT-PCR表明，NO处理后的果实中sGC表达量高于对照组，且在处理的第28天表达量最大。将sGC转染大肠杆菌，通过构建克隆及表达载体，经纯化后得到重组sGC蛋白。电化学分析检测NO对重组sGC蛋白的影响，由实验结果可知，加入NO进行扫描时出现了明显的氧化还原峰，表明NO与sGC蛋白发生了反应。根据文献中已发表的提取sGC的方法从肥城桃果实中提取蛋白，利用高效液相色谱法进行酶动力学实验，检测底物浓度，温度及pH对酶活性的影响，最终得到最适底物浓度为4mmol L-1，最适温度为25oC，最适pH=7.6。在优化的条件下检测NO对提取酶的影响，通过实验可知，加入NO后酶的活性明显增大。