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第一部分GLP-1受体激动剂利拉鲁肽在对慢性排斥反应的作用以及对移植物内GLP-1受体的调节目的:探讨利拉鲁肽在心脏慢性排斥反应中的作用及其对移植物内受体的调控。方法:建立供体bm12到受体B6单个组织相容性复合物Ⅱ（major histocompatibility complex class Ⅱ,MHC-Ⅱ）不匹配的小鼠心脏移植慢性排斥模型。实验分为两组,对照组:从移植第一天起,每天给予两次受体皮下注射0.9%的生理盐水;实验组:从移植第一天起,每天给予两次受体皮下注射利拉鲁肽（300μg/kg）。观察并记录各组血糖变化;移植后八周时,EVG血管弹性纤维染色及Masson染色分析各组受体移植物血管病发病情况以及间质纤维化程度;免疫荧光以及Western Blot分析移植后各组心脏内GLP-1受体表达及分布情况。结果:与对照组相比,利拉鲁肽治疗后能明显改善移植物血管病（血管堵塞程度:利拉鲁肽组:32.28±6.28%;对照组:63.39±7.78%,p<0.05）和减轻心肌内纤维化程度（利拉鲁肽组:13.76±1.49%;对照组:22.82±2.67%,p<0.05）。组织蛋白Western Blot结果显示:与对照相比,利拉鲁肽能上调移植物内GLP-1受体的表达,并且差异有统计学意义（p<0.05）。免疫荧光实验中GLP-1受体（GLP-1R）与内皮细胞标记物CD31共染发现,两组中GLP-1R+CD31+双阳性的细胞占所有GLP-1R+细胞的都超过60%以上,但两组之间比例无明显统计学差异（p>0.05）,说明GLP-1受体主要分布于内皮细胞上,利拉鲁肽不影响GLP-1受体在细胞间的分布比例;分析GLP-1R+CD31+双阳性的细胞占所有CD31+细胞的比例,发现相较于对照组,利拉鲁肽组比例增高（利拉鲁肽组:48.18±5.96%;对照组:20.40±3.0%,p<0.05）,说明利拉鲁肽能上调移植物内皮细胞上GLP-1受体的表达。结论:GLP-1受体激动剂利拉鲁肽能抑制慢性排斥反应,移植物内皮细胞上GLP-1受体可能在慢性排斥反应中发挥重要作用。第二部分GLP-1受体激动剂利拉鲁肽在慢性排斥反应中对同种异体免疫反应及移植物内炎症浸润的影响目的:探索GLP-1受体激动剂利拉鲁肽在慢性排斥反应中对同种异体免疫反应及移植物内炎症浸润的影响。方法:构建心脏慢排模型,并用利拉鲁肽干预,于移植后第2、8周取各组标本,免疫组化染色分析各组移植物中炎症细胞浸润情况。流式细胞术分析各组T细胞亚群的激活及分化情况。免疫组化分析2周移植物内趋化因子以及粘附分子表达情况。体外TNF-α内皮细胞激活实验分析利拉鲁肽对内皮细胞的保护作用。结果:免疫组化显示移植后2周和8周时,利拉鲁肽可以减轻移植物内炎症细胞（CD4+、CD8+、CD11b+）的浸润,减少内皮细胞上趋化因子MCP-1,粘附分子VCAM-1的表达,流式细胞术检测发现利拉鲁肽对移植物脾脏内T细胞物无明显直接影响。体外实验证实利拉鲁肽能直接抑制激活的内皮细胞上粘附分子VCAM-1 m RNA的表达。结论:利拉鲁肽通过保护内皮细胞,减少移植物内炎症细胞的浸润,从而改善慢性排斥反应。第三部分GLP-1受体激动剂利拉鲁肽在慢性排斥反应中对内皮向间质转化（End MT）的作用及机制目的:探讨GLP-1受体激动剂利拉鲁肽在慢性排斥反应中对内皮向间质转化的作用及机制。方法:构建心脏慢排模型,并用利拉鲁肽干预,于移植后第8周取各组标本,免疫荧光及Western Blot分析移植后各组心脏内内皮向间质转化情况。在体外TGF-β1刺激人冠状动脉内皮细胞（HCAECs）发生End MT的细胞模型中,评价利拉鲁肽对内皮细胞上GLP-1受体表达以及End MT的影响,并探索其可能的分子机制。结果:免疫荧光内皮细胞标记CD31与间质细胞标记α-SMA显示,慢性排斥阶段,移植心内CD31+α-SMA+双阳性细胞出现说明该细胞发生了End MT,CD31+α-SMA+双阳性细胞占CD31+细胞的比例表示正在发生End MT的内皮细胞的比例,而与对照组相比,利拉鲁肽减轻该转化过程（利拉鲁肽组:15.80±2.75;对照组:35.04±6.05,p<0.05）;组织的Western Blot分析同样发现,与对照组相比,利拉鲁肽组CD31含量增加,而α-SMA含量减少,两组之间差异具有统计学意义。体外细胞实验证实利拉鲁肽能通过GLP-1受体抑制Smad3以及Akt的活化,从而抑制HCAECs的内皮向间质转化,并上调了内皮细胞上GLP-1受体的表达。结论:GLP-1受体激动剂利拉鲁肽有效的抑制移植心脏内End MT,减轻慢性排斥反应。