绿豆(Vigna radiata L.)是一种抗逆性强、适应性广的豆类作物,在农业种植结构调整和高效农业生产以及经济发展中具有重要作用。豆象是危害绿豆种植、生产和仓储最重要的害虫。筛选抗豆象材料并加以在绿豆育种工作中应用,对绿豆的生产及采摘后的储藏具有重要的意义。DNA分子标记技术广泛的应用在基因精细定位、种质资源鉴别、作物的遗传育种等方面。随着高通量测序技术的迅猛发展和绿豆基因组测序的完成,为开发绿豆InDel标记提供了数据参照和基础。目前,绿豆基因组上可用的InDel标记非常少,开发大量具有多态性的InDel标记对绿豆相关研究具有重要的意义。本研究进行了抗豆象绿豆品种筛选及InDel标记的开发,主要内容如下:1.对100份绿豆代表性资源进行室内豆象鉴定试验,根据豆象对绿豆的危害程度分别筛选得到抗豆象品种‘V2709’和达到中抗级别的7个品种‘G254’、‘V4718’、‘苏抗2号’、‘苏抗3号’、‘苏抗4号’、‘中绿3号’、‘晋绿7号’。在国内3个不同地区对抗豆象品种‘苏抗2号’、‘苏抗3号’、‘苏抗4号’、‘中绿3号’、‘晋绿7号’进行多点的田间抗豆象鉴定,通过对收获后的绿豆产量和抗性鉴定筛选得出‘苏抗3号’的产量和抗性较高。以上研究不但为后续抗豆象育种提供抗性亲本,而且对生产上抗豆象品种的种植提供了试验依据。2.第二代测序技术对抗豆象品种‘V2709’和感豆象品种‘苏绿1号’和进行重测序获得原始序列,开发了适合绿豆遗传育种研究的InDel标记。利用mInDel软件生成了 1809个InDel标记。1809个InDel标记序列与绿豆参考基因组比对,匹配在染色体的共1107个InDel标记,明确了 InDel标记在染色体的物理位置,为今后绿豆的基因定位等研究提供基础。分子标记多态性的高低是其能否在研究中得到广泛的使用的重要条件,比对匹配的1107个InDel标记进行了多态性检测,其中91.9%的InDel标记有多态性。mInDel软件开发的InDel标记在InDel大小、染色体的分布和测序样本多态性得到了准确的评估和验证。3.采用20份代表性强、来源广的绿豆品种进行InDel标记的筛选,得到了22个全部扩增且多态性较高InDel核心标记。利用UPGMA构建104份绿豆品种聚类树状图,遗传相似系数0.54为阈值可以分成Ⅰ、Ⅱ,2个类群。群体Ⅱ包含了所有的野生型绿豆资源,可将野生和栽培品种完全的区分,遗传分析说明供试的绿豆品种基本已脱离地域的影响。利用22个InDel标记对104份绿豆品种构建的DNA分子指纹库,可将绿豆品种完全区分开,为绿豆名品种保护、原产地溯源管理等提供科学依据。