猪囊尾蚴是带科带属的猪带绦虫（Taenia solium）幼虫，常见于肌肉组织，引起猪和人的囊虫病，进而影响养猪业的发展和人类的健康。由于寄生环境的影响，猪带绦虫以糖酵解为主，进行物质和能量代谢。烯醇化酶（enolase，ENO，酶分类编号：EC4.2.1.11）是一种多功能蛋白，广泛存在于许多生物体内，不仅作为糖酵解酶影响细胞的物质和能量代谢，又具有参与病原体入侵宿主、免疫刺激蛋白及热激蛋白等多种功能。因此，本文对enolase进行了克隆、表达及功能的研究。取得如下结果：1.以猪带绦虫的cDNA为模板，首次扩增获得猪带绦虫enolase基因。Real-time PCR结果表明，enolase在成虫期表达量高。利用生物信息学软件，对该基因进行序列分析。序列分析表明该基因ORF大小为1302bp，编码433个氨基酸，理论分子质量为46.56ku，分析了猪带绦虫烯醇化酶可能的纤溶酶原结合基序（238GKVKIGMDVAASEFYQDGKYNLDF261）。2.成功构建了重组表达质粒pET-30a（+）-ENO，并获得了以可溶性形式高效表达的重组蛋白rTsENO，大小约为53ku。Western blotting检测结果表明，rTsENO能被猪囊尾蚴病阳性血清特异性识别。配基试验、纤溶酶原激活试验及竞争性试验结果表明：rTsENO具有良好的纤溶酶原结合能力；当存在纤溶酶原激活剂t-PA时，rTsENO促进纤溶酶原被激活并产生纤溶酶；6-ACA可以抑制rTsENO与纤溶酶原的结合。3.应用rTsENO免疫家兔，经4次免疫后，家兔产生了高滴度的特异性IgG抗体。免疫组化试验结果表明，rTsENO主要在成虫的体壁及生殖器官内表达。4.在不同底物浓度、不同rTsENO浓度、不同pH值及不同金属离子存在条件下，利用紫外分光光度计，连续检测rTsENO在240nm时磷酸烯醇式丙酮酸吸光度的增加量或减少量。结果表明：以2-PGA为底物所测的rTsENO比活力为60.72±0.84U（mg protein）-1，以PEP为底物所测的rTsENO比活力为22.64±1.05U（mg protein）-1。rTsENO的最佳pH值范围是7~7.5。在金属离子存在时，rTsENO才具有酶活力，且Mg2+存在时，rTsENO酶活力最高。NaCl、MgCl2和CaCl2均具有抑制rTsENO酶活力的作用。在以2-PGA为底物时，50~200mmol/L KCl对rTsENO酶活力有轻微激活作用；以PEP为底物时，在检测浓度范围内，KCl均呈现抑制作用。综上所述，重组表达的猪带绦虫烯醇化酶（rTsENO）能被猪囊尾蚴病阳性血清特异性识别，具有良好的纤溶酶原结合能力及酶活力。这为进一步阐明猪带绦虫的代谢、入侵及致病机理奠定了理论基础。