丹参饮提取工艺及微丸制备工艺研究

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目的:现代药理研究证明,丹参饮可扩张冠状动脉和周围血管,使得冠脉血流量增加而致血压降低。当心功能不全时,丹参饮可改善心肌收缩力,同时加快侧支循环及体内血流的再分配,降低冠心病患者的血浆黏度,改善红细胞比容,进而改善微循环。因而对冠心病患者血液的“黏、聚、滞”的倾向有很好的治疗作用,具有可观的开发潜力。为将丹参饮方剂开发成临床上安全、有效、使用方便的新剂型,本课题选择丹参饮方剂为研究对象,采用化学-药理-药剂相结合的思路,以丹参饮提取物目标成分最大化提取为切入点,使用新技术超临界二氧化碳提取(SFE-CO2)及均匀实验设计方法优选提取工艺,并采用异丙肾上腺素诱导小鼠心肌缺血模型对提取方法进行药效学评价以确定最佳提取工艺,进而将该方剂制备成中成药——微丸制剂。本论文旨在借助对丹参饮方剂的系统研究,为开发临床上安全、有效、使用方便的治疗冠心病的新药提供一定的实验研究基础。方法:在实验室前期研究、系统总结和相关文献研究的基础上,本课题采用传统的水煎煮法和超临界萃取方法对丹参饮方剂进行提取,应用HPLC.GC法等方法对目标成分进行含量测定,均匀实验设计优选出最佳提取工艺,同时运用异丙肾上腺素诱导小鼠急性心肌缺血模型,以小鼠心电图(ECG)S-T段值、血清CK和LDH活性为考察指标对各提取方法制得的样品进行初步药效比较评价,确定丹参饮方剂的最佳提取方法,以该方法提取丹参饮药材制成微丸制剂,并对制剂进行制备工艺、指纹图谱研究及抗心肌缺血药效研究。成果:1.在丹参饮方剂水煎煮法中发现,丹参饮水提液中水溶性成分丹参素、原儿茶醛和丹酚酸B不稳定,其中丹酚酸B降解符合一级动力学特征,Arrhenius方程为IgK=-2485/T+5.606。2.采用均匀实验实验设计确定了①丹参饮方剂水煎煮法最优提取工艺为:12倍量水,提取2次,每次1.5h;②超临界结合药渣水煎煮法提取最优工艺为:萃取压力30Mpa,萃取温度45℃,提取时间2.5h;药渣水煎煮工艺为:10倍量水,2次,每次0.5h;③超临界萃取结合药渣醇提法最优提取工艺为:萃取压力30Mpa,萃取温度45℃,提取时间2.5h;药渣醇提工艺为:95%乙醇,10倍量,提取2次,每次0.5h。3.丹参饮不同提取方法样品各给药组对异丙肾上腺素诱导的急性心肌缺血小鼠均具有不同程度的保护作用,均可降低小鼠心电图S-T段抬高值,降低小鼠血清CK及LDH活性。4.确定了微丸制剂简单可行的制备方法,其中处方组成为:丹参饮总提取物(超临界提取物+药渣醇提干膏粉):MCC:乳糖:6%HPMC=1:2:1:2.5.(即载药量为25%),物料总量为88.24g。成型工艺为:挤出转速为20Hz,滚圆转速为lOHz,滚圆时间为7min。5.建立了丹参饮微丸HPLC及GC-MS指纹图谱,与原提取物比较,其特征峰相似。6.丹参饮微丸可在一定程度上降低心肌缺血小鼠S-T段抬高,血清CK及1,DH活性。结论:本课题运用现代新技术新方法、化学一药理相结合的研究思路和中药微丸制剂研究方法对丹参饮方剂提取方法、药效学筛选以及微丸制剂工艺及指纹图谱进行了初步探讨和研究,可得出以下结论:1.丹参饮方剂中水溶性成分丹酚酸B不稳定,降解符合一级动力学方程,在加热提取过程中应注意加热温度与时间。2.丹参饮方剂指标成分最优提取方法为超临界萃取结合药渣醇提方法,提取物具有一定的抗心肌缺血的作用。3.通过丹参饮微丸HPLC及GC-MS指纹图谱以原提取物比对可以得出:挤出滚圆法制备的丹参饮微丸基本保留了原提取物的特征成分,微丸的制备工艺简单可行。4.丹参饮微丸对心肌缺血小鼠具有一定的保护作用。
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