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ZNF191基因是我们实验室1997年率先报道的的一个人类C2H2型锌指蛋白基因。已完成的前期研究表明ZNF191在人的心、脑、胎盘、肝脏、肺脏、骨骼肌、肾、胰腺均有表达；ZNF191的mRNA在肝癌组织中呈现显著性上调。我们通过real-time PCR和Western blot方法进一步确证ZNF191基因在肝癌组织中呈上调表达。为了探讨ZNF191基因在肝癌细胞中上调表达的生物学意义,我们利用基因芯片(Affymetrix HG-133 Plus2.0)检测了L02细胞中内源ZNF191干扰后,基因表达谱的变化。而后用real-time PCR方法对在芯片检测中表达变化最大的几个基因进行验证。并选择其中若干代表性基因如β-Catenin等进行功能研究以揭示ZNF191调节下游靶基因的转录机制,及其生物学意义。经对L02细胞中内源ZNF191干扰后基因表达谱变化详细分析后,我们发现包括细胞周期相关基因、信号通路因子、转录调节因子、细胞黏附因子、与锌离子结合相关基因、与软骨/骨骼发育相关基因等功能基因的表达发生变化,提示了ZNF191在体内发挥着广泛的调节功能。令我们非常感兴趣的是,在ZNF191干扰后表达变化的基因中,其中有数个基因与细胞内重要的信号通路Wnt通路相关。其中β-Catenin mRNA水平下调0.33倍,并且其下游基因CyclinDl也下调0.5倍。通过Western blot实验证实ZNF191基因干扰后β-Catenin和CyclinDl蛋白表达水平也下降,而外源高表达ZNF191则上调其蛋白水平。构建稳定消减ZNF191基因的L02、Hep3B细胞株,其β-Catenin和CyclinD1蛋白表达水平下降,细胞周期S期比例降低,生长减慢。因此ZNF191可以通过正向调节β-Catenin,从而影响细胞的周期和生长。荧光素酶实验提示ZNF191能够激活全长CTNNB1启动子的转录活性,也能促进CCND1启动子的转录,CCND1启动子区中CTNNB1作用的位点LEF/TCF突变后,则激活水平下降。通过CTNNB1启动子5’端逐步缺失,我们鉴定出CTNNB1启动子P(-1407/-907)区域内有ZNF 191作用的区域。EMSA实验证实纯化ZNF191蛋白能直接结合CTNNB1启动子,并且将结合区域缩小在P(-1254/-1224)30个碱基序列范围内,直接结合的关键DNA序列为ATTAATT.综上,ZNF191在肝癌内呈上调表达,通过对肝癌细胞株1.02细胞内ZNF191基因干扰后的基因表达谱分析,首次发现ZNF191基因能上调Wnt通路。ZNF191基因能直接和CTNNB1启动子结合,促进β-Catenin及其下游基因CyclinD1的转录,从而促进肝癌细胞的生长。ZNF191基因作为肝癌上调表达基因,对于肝癌的诊断、治疗以及开发新的药靶将会有重要的意义。