【摘 要】
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目的:本研究利用体外实验的方法,观察富碘中药对FRTL-5细胞增殖和凋亡的影响,基于TSHR及受体后转导通路探讨GD甲状腺肿的发病机制,为治疗GD甲状腺肿提供新的循证医学证据。材料与方法:实验动物Wistar大鼠18只（6-8周龄）,随机分为正常组、富碘中药组、Na I组,共3组。制备含药血清:正常组用蒸馏水进行灌胃,后两组分别用富碘中药和Na I灌胃。连续灌胃2周,每天1次,于末次灌胃1h后腹主
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目的:本研究利用体外实验的方法,观察富碘中药对FRTL-5细胞增殖和凋亡的影响,基于TSHR及受体后转导通路探讨GD甲状腺肿的发病机制,为治疗GD甲状腺肿提供新的循证医学证据。材料与方法:实验动物Wistar大鼠18只（6-8周龄）,随机分为正常组、富碘中药组、Na I组,共3组。制备含药血清:正常组用蒸馏水进行灌胃,后两组分别用富碘中药和Na I灌胃。连续灌胃2周,每天1次,于末次灌胃1h后腹主动脉取血,分离动物血清,0.22um过滤除菌,经56℃、30min灭活后,保存于-20℃备用。体外培养FRTL-5细胞,随机分为4组,正常组、模型组、富碘中药组、Nal组。除正常组外,其余组均加入1μg/ml的M22刺激FRTL-5细胞24h。正常组与模型组加入正常血清,其他用药组分别加入对应的含药血清进行干预。观察细胞加药后的生长情况。应用流式细胞术和MTT法检测甲状腺细胞增殖和调亡的情况,Western blot蛋白印迹法检测PKA C-?、p-PKA C（Thr197）、CREB、p-CREB（Ser133）、ERK、p-ERK（Thr202/Tyr204）蛋白的表达情况。结果:1.MTT法检测细胞增值情况:富碘中药组和Na I组对FRTL-5细胞增殖均有抑制作用。与正常组比较,模型组的细胞增殖量明显升高（P＜0.01）;与模型组比较,富碘中药组、Na I组细胞增值量明显下降（P＜0.01）;富碘中药组与Na I组比较,细胞增殖量差异不显著（P＞0.05）。2.流式细胞术检测细胞凋亡结果:富碘中药和Na I均能诱导FRTL-5细胞凋亡。与正常组比较,模型组细胞凋亡率下降（P＜0.01）;与模型组比较,富碘中药组与Na I组细胞凋亡率明显升高（P＜0.01）;富碘中药组细胞凋亡率与Na I组对比差异不显著（P＞0.05）。3.FRLT-5细胞p-PKA C、PKA C-?蛋白表达结果:与正常组比较,模型组p-PKA C蛋白表达量显著升高（P＜0.01）;与模型组比较,富碘中药组p-PKA C蛋白表达量下降（P＜0.01）;与模型组比较,Na I组p-PKA C蛋白表达量下降（P＜0.01）;与Na I组比较,富碘中药组p-PKA C蛋白表达量下降（P＜0.01）;各组的PKA C-?的蛋白表达量差异不显著（P＞0.05）。4.FRLT-5细胞p-CREB、CREB蛋白表达结果:与正常组比较,模型组p-CREB蛋白表达量显著升高（P＜0.01）;与模型组比较,富碘中药组p-CREB蛋白表达量下降（P＜0.01）;与模型组比较,Na I组p-CREB蛋白表达量下降（P＜0.01）。与Na I组比较,富碘中药组p-CREB蛋白表达量无显著差异（P＞0.05）。各组的CREB的蛋白表达量差异不显著（P＞0.05）。5.FRLT-5细胞p-ERK、ERK蛋白表达结果:与正常组比较,模型组p-ERK1/2蛋白表达量显著升高（P＜0.01）;与模型组比较,富碘中药组p-ERK1/2蛋白表达量下降（P＜0.01）;与模型组比较,Na I组p-ERK1/2蛋白表达量下降（P＜0.01）。与Na I组比较,富碘中药组p-ERK1/2蛋白表达量无显著差异（P＞0.05）。各组的ERK1/2的蛋白表达量差异不显著（P＞0.05）。结论:1.富碘中药含药血清能抑制FRTL-5细胞过度增殖,诱导FRTL-5细胞凋亡。2.富碘中药能有效下调PKA、CREB、ERK的蛋白表达,说明富碘中药可以通过抑制相关蛋白表达,影响甲状腺水平。
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