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目的：盆腔器官脱垂(POP)是严重影响中老年妇女生活质量的一种常见病,其发病机制尚不完全清楚。POP的发生与盆底结缔组织的结构及功能完整性被破坏有关,其中胶原纤维和弹性纤维是连接固定盆腔脏器的主要组织结构,它们的成分变化和代谢异常可能是女性POP的发病机制之一。研究发现盆底组织中功能性弹性纤维数量的减少及其平衡态紊乱可能是POP的病因学基础,Fibulin-5是细胞外基质蛋白Fibulin家族中的最新成员,对形成弹性纤维十分关键；而类赖氨酰氧化酶1 (LOXL1)是弹性纤维和胶原纤维发育成熟和保持内环境稳定的关键酶。本研究检测了Fibulin-5和LOXL1在骶韧带和阴道壁组织中的表达及弹性纤维成分的变化,旨在探讨盆底组织结构及功能的改变与POP发生的相关性,期望在预防和治疗POP方面探求新的思路。方法：选取2009年1月至2009年10月在河北医科大学第二医院妇产科诊断为POP并行手术治疗的15例患者作为研究组,并选取同期因妇科良性疾病接受手术治疗的10例患者作为对照组。两组中所有患者近3个月内均无激素类药物应用史,且在年龄、产次、体重指数(BMI)方面具有可比性(P>0.05)。在获得医院伦理委员会同意并取得患者的知情同意后,在术中分别留取对照组妇女和POP患者的骶韧带和(或)阴道前后壁组织,以液氮冻存和甲醛固定两种方式保存留取的组织。1对经液氮冻存的标本采用实时定量PCR (Real-time RT-PCR)检测其中Fibulin-5及LOXL1的mRNA表达,其表达水平以测得的相对定量值(RQ值)表示,采用SPSS13.0数据包分析软件,对所得数据进行统计。结果进行t检验,以均数±标准差(x±s)表示,相关性检验采用Pearson相关性分析法,以P<0.05定为有显著性差异。2对经甲醛固定的标本采用免疫组织化学ElivisionTM Plus两步法检测Fibulin-5及LOXL1蛋白的表达,其表达情况根据细胞染色面积和染色强度进行综合评分,所得结果采用Fisher确切概率法,相关性检验采用Spearman相关性分析法,以P<0.05定为有显著性差异。结果：1一般情况POP组与对照组妇女在年龄、产次、BMI方面具有可比性。2冰冻标本组织中Fibulin-5及LOXL1 mRNA的表达水平2.1在不同盆底组织中Fibulin-5 mRNA的表达水平POP组(15例)患者骶韧带组织中Fibulin-5 mRNA的表达水平为0.695±0.215,明显低于对照组(10例)1.530±0.340,差异有统计学意义(P<0.05);且POP-Q评分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期患者(各5例)骶韧带组织中Fibulin-5 mRNA的表达量均数随POP程度加重而降低(依次为0.935、0.633、0.472)；各期差异均有统计学意义(P<0.05)；与对照组(10例)相比,POP组(10例)患者阴道前壁组织中Fibulin-5 mRNA的表达水平亦显著下降(1.731±0.091 vs 0.979±0.030),差异有统计学意义(P<0.05)。2.2在不同盆底组织中LOXL1 mRNA的表达水平POP组(15例)患者骶韧带组织中LOXL1 mRNA的表达水平为1.920±0.570,明显高于对照组(10例)0.434±0.288,差异有统计学意义(P<0.05);且POP-Q评分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期患者(各5例)骶韧带组织中LOXL1 mRNA的表达量均数随POP程度加重而增加(依次为1.389、1.870、2.647),各期差异均有统计学意义(P<0.05)；与对照组(10例)相比,POP组(10例)患者阴道前壁组织中LOXL1 mRNA的表达水平亦显著增加(0.624±0.017 vs 0.969±0.044),差异有统计学意义(P<0.05)。2.3在不同盆底组织中Fibulin-5、LOXL1 mRNA表达的相关性分析Fibulin-5与LOXL1的相关关系：Fibulin-5与LOXL1 mRNA的表达水平呈负相关关系(r=-0.717,P<0.05)。3石蜡标本组织中Fibulin-5及LOXL1蛋白的表达情况3.1在不同盆底组织中Fibulin-5蛋白的表达Fibulin-5蛋白在骶韧带及阴道前后壁组织中的表达主要定位于细胞外基质,POP组患者骶韧带中Fibulin-5蛋白表达的阳性率为26.7%(4／15),明显低于对照组的阳性表达率80%(8／10),差异有统计学意义(P<0.05)；与对照组相比,POP组患者阴道前壁组织中Fibulin-5蛋白的阳性表达率显著下降(80%(8／10)vs 30%(3／10)),差异有统计学意义(P<0.05),且阴道后壁组织中Fibulin.5蛋白的阳性表达率亦显著下降(80%(8／10)vs30%(3／10)),差异有统计学意义(P<0.05)。3.2在不同盆底组织中LOXL1蛋白的表达LOXL1蛋白在骶韧带及阴道前后壁组织中的表达主要定位于成纤维细胞和平滑肌细胞胞质中,POP组患者骶韧带中LOXL1蛋白表达的阳性率为86.7%(13／15),明显高于对照组阳性表达率40%(4／10),差异有统计学意义(P<0.05)；与对照组相比,POP组患者阴道前壁组织中LOXL1蛋白的阳性表达率增高(20%(2／10)vs 70%(7／10)),差异有统计学意义(P<0.05),且阴道后壁组织中LOXL1蛋白的阳性表达率亦增高(10%(1／10)vs 60%(6／10)),差异有统计学意义(P<0.05)。3.3在不同盆底组织中Fibulin-5.LOXL 1蛋白表达强度的相关性分析Fibulin-5与LOXL1的相关关系:Fibulin-5与LOXL1蛋白的表达强度呈负相关(r=-0.653,P<0.05)结论：1在mRNA和蛋白水平的检测结果中均显示,POP患者骶韧带和阴道壁组织中Fibulin-5的表达降低,而LOXL1的表达升高,且变化的程度均与脱垂程度相关。说明两者可能通过影响弹性纤维的聚合过程,促进POP的发病。2本研究结果显示Fibulin-5和LOXL1的表达水平具有负相关关系,推测它们可能存在某种意义上的关联,二者之间相互作用促进了POP的发生。