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微量残留白血病细胞(MRLC)的检测是急性白血病(AL)研究中的重要问题,具有很大的应用价值。如确定高危组患者,早期检测复发,提高自身骨髓移植(ABMT)效果(决定采髓的最好时机和检测移植骨髓中MRLC)等。在现有的检测方法(细胞形态学、免疫学、细胞遗传学、克隆形成试验和分子生物学等)中,免疫学标志分析法(双色免疫荧光染色,DCIF)和分子生物学方法(聚合酶链反应,PCR)是检测MRLC的二种敏感方法。本文建立了二种实用性检测MRLC的方法。一种是用于CD10~+急性淋巴细胞白血病(ALL)检测MRLC的DCIF联合密度梯度离心剂Percoll(简称DCIF法),检测微量CD10~+淋巴细胞的敏感度是1/10000。检测CD10~+MRLC的敏感度是1/1000~1/10000,特异性较强,临床检测了Common型ALL(C-ALL)患者10例,在其中4例临床已判断完全缓解(CR)的外周血标本中检出0.08%或以上的MRLC,1例比临床提前6周预测了白血病细胞的重现。另一种是用于检测以N-ras癌基因点突变为克隆标志的急性髓细胞白血病(AML)患者骨髓内MRLC的PCR技术加寡核苷酸探针杂交法(简称PCR法),可扩增出10pg的微量DNA。检测MRLC敏感水平是0.5%~0.1%,特异性强,临床筛选检测了10例AML患者,证实其中3例出现N-ras基因第13位点突变(突变率30%),随访其中2例的初步结果表明N-ras点突变可作为白血病细胞克隆标志用于检测MRLC。 本文介绍的两种MRLC检测方法在国内是首次报道,检测敏感度和特异性达到国际上同类研究的先进水平,对进一步开展MRLC的临床和实验研究具有理论和临床应用价值。