【摘 要】
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该文的工作采用平板透明圈法筛选到10株产壳聚糖酶的真菌,包括9株白僵菌(Beauveria)和1株腐皮镰孢菌(Fusarium solani).它们在含壳聚糖的平板上都产生透明圈,表明具有分解壳
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该文的工作采用平板透明圈法筛选到10株产壳聚糖酶的真菌,包括9株白僵菌(Beauveria)和1株腐皮镰孢菌(Fusarium solani).它们在含壳聚糖的平板上都产生透明圈,表明具有分解壳聚糖的能力,但各菌株水解壳聚糖的能力有所不同,以白僵菌IBC1019号菌株和腐皮镰孢菌0114号菌株为最高.首先,通过对9株白僵菌进行以壳聚糖为唯一碳源的摇瓶培养,结果显示还原糖含量有不同程度升高,表明在壳聚糖的诱导下产生壳聚糖酶,并且对培养基中的壳聚糖进行了降解.但从对培养5天后的产物进行薄层层析看,只有两株菌的降解产物中壳寡糖含量较高,其它菌株的降解产物多为单糖,不符合我们的筛选目的.通过对IBC1019号菌株酶活连续测定,发现培养至第3天时酶活达到最高峰,第4天时开始下降.其次,通过对腐皮镰孢菌(0114)的摇瓶培养,表明该菌株壳聚糖酶的产生不需要壳聚糖诱导;该菌培养84小时达到酶活高峰,酶的最适作用温度为50℃实验表明,随着作用体系中酶量、壳聚糖脱乙酰度的增加和降解时间的延长、壳聚糖降解率逐渐提高,93mU/ml作用酶量,50℃下处理4小时,壳聚糖的降解率达到41.1﹪.利用薄层层析图对酶降解产物进行分析,可见层析板上有明显的寡糖斑点,而单糖斑点非常浅,说明此条件下,单糖生成量极少,而不同聚合度的壳寡糖生成较多.白僵菌的壳聚糖酶为诱导酶,从酶解产物的分析来看,壳寡糖的种类及数量较少,而腐皮镰孢菌不经诱导即可向胞外大量分泌壳聚糖酶,其产物壳寡糖的种类及数量较多,具有较高的应用开发价值.
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