【摘 要】
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研究背景胃癌在男性所患肿瘤中排名第四,在女性所患肿瘤中排名第五,并且是世界上第二大肿瘤致死原因。多数患者在进展期才被确诊为胃癌,他们的预后往往不好,五年生存率较低。
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研究背景胃癌在男性所患肿瘤中排名第四,在女性所患肿瘤中排名第五,并且是世界上第二大肿瘤致死原因。多数患者在进展期才被确诊为胃癌,他们的预后往往不好,五年生存率较低。其中一个重要的原因就是缺乏早期诊断的标志物。因此,十分有必要研究胃癌的分子机制以确定早期诊断的标志物以及有效治疗的靶点。越来越多的证据表明微小RNA可以通过调节下游的靶基因起到促癌基因或抑癌基因的作用。miR-324-3p已经被报导在多种肿瘤中起作用,但其对胃癌的影响尚不清楚。本研究旨在探索miR-324-3p对胃癌发生发展的影响。方法我们采用qRT-pcr技术来检测胃癌细胞株和胃癌组织中的miR-324-4p的表达量,并且使用细胞活力实验,集落形成实验,细胞迁移实验以及流式细胞术研究miR-324-3p对胃癌细胞的影响。双荧光素报告基因实验被用来检验miR-324-3p是否能够与潜在的靶点相互作用。蛋白印迹法被用来检测Smad4以及beta-catenin的表达量。同时我们还检测了细胞内ATP水平。我们使用裸鼠建立了成瘤模型,并且使用新鲜胃组织构建类器官模型。结果与周围正常组织相比,miR-324-3p在胃癌组织中表达量更高。过表达miR-324-3p可以促进细胞增殖,迁移并且减少细胞凋亡。miR-324-3p可以抑制Smad4的表达,并且Smad4的下调可以激活Wnt/bata-catenin通路。过表达Smad4可以逆转miR-324-3p对胃癌细胞的影响。随着miR-324-3p的过表达,细胞内的ATP水平也随之上调。mi R-324-3p可以促进裸鼠体内肿瘤生长以及类器官的生长。结论miR-324-3p可以激活Smad4调节的Wnt/beta-catenin通路来促进胃癌的发展。miR-324-3p/Smad4/Wnt通路轴可能是一个潜在的治疗胃癌进展的靶点。
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