两株红树植物内生真菌HNWSW-1和HNWSW-2的次生代谢产物研究

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具有“海上森林”之称的红树林是分布于热带、亚热带海岸潮间带的木本植物群落,是一种特殊的海洋生态系统,其中蕴藏着丰富的微生物资源。为了适应周期性遭受海水浸淹的特殊环境,红树植物及其共附生微生物可能具有适应该特殊环境的特殊代谢机制,从而代谢产生结构新颖、生物活性多样的代谢产物。红树林内生真菌是红树林微生物的主要组成类群,是海洋真菌的第二大类群,近年来,从其次生代谢产物中发现并报道了一系列化学结构新颖、生物活性良好的单体化合物,受到科学家们的广泛关注,成为天然产物研究的热点之一。角果木(Ceriops tagal)为红树科(Rhizophoraceae)角果木属(Ceriops)植物,木果楝(Xylocarpus granatum)为楝科(Maliaceae)木果楝属(Xylocarpus)植物,本研究组前期从角果木和木果楝各部分组织中分离得到上百株内生真菌,并从其次生代谢产物中分离获得多个结构新颖、生物活性良好的单体化合物。本次研究在研究组前期工作基础上,通过改变不同培养基条件对两株红树植物内生真菌HNWSW-1和HNWSW-2的发酵条件进行优化,结合化学分析(TLC与HPLC相结合)和生物活性检测结果,以最优发酵条件进行发酵,利用分子生物学方法对其进行鉴定,采用多种柱色谱技术对其次生代谢产物进行分离纯化,通过波谱数据分析结合理化常数对所得单体化合物的结构进行鉴定,同时,对所得单体化合物的抗菌活性、乙酰胆碱酯酶抑制活性、a-葡萄糖苷酶抑制活性、细胞毒活性及全齿复活线虫(Panagrellus redivivus)抑制活性进行测试。对角果木内生真菌Cladosporium sp. HNWSW-1的次生代谢产物进行研究,从中分离得到 13 个单体化合物:cladoconvolutin A (1),cladoconvolutin B (2),cladoconvolutin C (3), (10S)-3-(3, 3-dichloro-2-hydroxy-propyl)-8-hydroxy-6-methoxy-isochromen-1 -one (4) , (E)-7-hydroxy-5-methyl-2-(prop-1’-en-1’-yl)-4H-chromen- 4-one (5),(11R)-2,4,7-trihydroxy-6-(1-hydroxyethyl)anthracene-9,10-dione (6),(5S)-5-hydroxy-7-(4"-hydroxy-3"-methoxy-phenyl)-l-phenyl-3-heptan-one (7) , (7R)-methoxypurpuride (8),(5aS,9S,9aS)-1,3,4,5,5a,6,7,8,9,9a-decahydro-6,6,9a-tri-methyl-3-oxonaphtho[1,2-c]furan-9-y1 N-acetyl-L-valinate (9), 2-chloro-3, 5-dimeth- oxybenzyl alcohol (10),2-chloro-5-methoxy-3-methylphenol (11),ergosterolperoxide(3β-hydroxy-5,8-epidioxyergosta-6, 22-diene) (12),ilicicolinH (13)。其中化合物 1-6 个为新化合物,化合物7-13为已知结构化合物,并首次报道了化合物11的1HNMR谱和13CNMR谱数据。从木果楝内生真菌Xylaria sp. HNWSW-2的次生代谢产物中分离得到7个化合物,分别鉴定为:xylquinone (14),xylalkaloid (15),5-(1’-hydroxy-3’-methylpentyl)-2-(hydroxymethyl) -4H-pyran-4-one (16 和 17), astropyrone (18),guaidiol (19),吲唑(20)。其中化合物14-17个为新化合物,化合物20为首次从微生物的代谢产物中分离得到。生物活性测试结果表明:化合物7、10具有抑菌活性;7~10具有全齿复活线虫抑制活性;化合物6-10、13和18~19具有弱的乙酰胆碱酯酶抑制活性;1、6和18具有不同程度的α-葡萄糖苷酶抑制活性;化合物1和化合物13对人肝癌细胞株BEL-7402和人子宫颈癌细胞HeLa具有细胞毒活性。本研究对两株红树林来源内生真菌进行研究,在其次生代谢产物中发现,部分单体化合物具有全齿复活线虫抑制活性,为研究农业病原线虫抑制剂提供科学基础。
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