石见穿对非小细胞肺癌细胞的抑制作用及其生物学机制研究

来源 :上海中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:shrimpdragon
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目的:通过一系列体内外实验对中药石见穿(Salvia chinensis Benth,SJC)的抗肿瘤作用进行研究,以期为临床用药和石见穿的进一步开发提供依据。方法:体内实验:用荧光素酶转染的Lewis肺癌细胞(LUC-LLC)建立小鼠非小细胞肺癌(NSCLC)原位模型,将小鼠分为生理盐水对照组、低剂量石见穿组和高剂量石见穿组,隔口开始灌胃,共给药2周。每7天进行一次活体成像,观测石见穿对小鼠肺部肿瘤细胞生长的影响。体外实验:采用MTT法、Wound Healing法和Transwell法检测石见穿对NSCLC细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响;采用流式细胞术检测石见穿对NSCLC细胞周期和凋亡的影响;Hoechst33342染色观察细胞在石见穿处理后的凋亡情况。结果:实验结果显示体内实验方面:低剂量和高剂量石见穿用药后,C57BL/6小鼠肺部的肿瘤细胞增长明显受抑制,与生理盐水对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);体外实验:(1) MTT实验结果证实:石见穿显著抑制非小细胞肺癌细胞的增殖,在特定浓度范围内呈时间依赖性和剂量依赖性;(2)WoundHealing实验结果显示:石见穿明显抑制LLC和H1299细胞爬行和迁移能力,且抑制效应呈剂量依赖性;(3) Transwell实验结果显示:0.2mg/mL石见穿处理后,LLC和H1299细胞的侵袭能力明显受抑制(P<0.01和P<0.001);(4)细胞周期结果显示:石见穿不同浓度(0mg/mL、0.05mg/mL、0.1mg/mL和0.2mg/mL)处理后的LLC和H1299细胞细胞周期分布发生变化:LLC细胞中G1期分布分别为31.94%、40.05%、45.11%和50.46%,H1299细胞中G1期分布为53.96%、58.5%、52.15%和65.84%。提示石见穿处理后,LLC和H1299细胞发生G1期阻滞;(5)细胞凋亡AnnexinⅤ/PI流式细胞术显示:H1299在石见穿诱导后发生明显的早期凋亡,且呈剂量依赖;Hoechst染色显示,细胞经石见穿处理后蓝色荧光增强,细胞核发生固缩,提示细胞凋亡的发生。结论:石见穿抑制体内外NSCLC细胞增殖并抑制NSCLC细胞迁移侵袭能力。石见穿对NSCLC细胞的抑制作用可能是通过诱导细胞周期阻滞和诱导细胞凋亡而产生的。
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