放线菌新物种TRM 49590的多相分类及其次生代谢产物的研究

来源 :塔里木大学 | 被引量 : 4次 | 上传用户:kekedala
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本研究以分离自新疆罗布泊土壤样品中潜在链霉菌新物种TRM49590为研究菌株,采用多相分类方法对其进行分类鉴定,确定其分类地位;再对其次生代谢产物进行分离纯化和抑菌活性追踪,以期获得活性次生代谢产物。1.链霉菌新物种TRM49590的多相分类采用多相分类方法,对分离自罗布泊的放线菌TRM49590进行分类研究,分类结果显示菌株TRM49590是革兰氏阳性,需氧型细菌。菌株TRM49590的最适pH为pH9-10,最适NaCl浓度为1.5%,最适生长温度为28-37℃,在ISP4培养基上气生菌丝呈圆柱状不规则分支,表面光滑。全细胞水解糖为核糖和葡萄糖;全细胞氨基酸类型为LL-DAP。主要的甲基萘醌类型为MK-9(H4), MK-9(H6), MK-9(Hg)和MK-10(H6)。主要的脂肪酸类型为iso-C16:0, anteiso-C15:0,anteiso-C17:0和iSO-C15:0。菌株TRM49590的(G+C)mol%为62.2mol%。极性脂的主要类型有双磷脂酰甘油(DPG),磷脂酰胆碱(PC),磷脂酰肌醇(PI),磷脂酰乙酰胺(PE),磷脂酰肌醇甘露糖苷(PIM)和2个未知的磷酸类脂(PL)和2个未知糖脂。基于16S rRNA序列的系统进化分析显示菌株TRM49590与菌株Streptomyces sodiiphilus的亲缘关系最近,同源相似性为97.16%。基于以上的检测结果和其他的异于已分类鉴定菌株的生理生化特征,最终确定TRM49590为链霉菌的新物种,命名为罗布泊链霉菌(Streptomyces lopnurensis sp. nov.),菌株编号为TRM49590T(=CCTCC AA2013018T=NRRL B59109T)。2.罗布泊链霉菌TRM49590次生代谢产物的研究以罗布泊链霉菌TRM49590为研究对象,采用分子生物学方法对其五种抗生素合成基因进行筛选,采用大孔树脂、硅胶柱层析、凝胶柱层析、高效液相色谱和制备液相色谱等方法对发酵液和菌体中次生代谢产物进行分离并进行抑菌活性追踪,采用核磁共振等方法对分离的化合物进行结构解析鉴定。结果显示,罗布泊链霉菌TRM49590含有HMG-CoA抗生素功能基因;其发酵原液对棉花枯黄萎病原菌、金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌有抑菌活性,A组分(氯仿/甲醇=10:1)和D组分(氯仿/甲醇=1:1)分别对棉花枯黄萎病原菌和金黄色葡萄球菌与表皮葡萄球菌有抑菌活性,菌体对棉花枯萎病病原菌有抑菌活性;最终从发酵液中获得了一个含氮化合物N-乙酰酪胺(ZA-1)。
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