肝缺血再灌注损伤是指肝脏组织缺血一段时间后血流重新恢复,损伤却进一步加重,甚至发生不可逆性损伤的现象。目前认为缺血再灌注损伤是造成肝损伤患者病发和死亡的主要原因,但在临床上尚缺乏有效的防治措施。肝脏缺血再灌注损伤是多因素参与的病理生理过程,自由基损伤和炎症反应是缺血再灌注损伤的关键因素。金属硫蛋白(MT)是一种富含巯基的小分子金属结合蛋白,具有清除自由基,对抗膜脂质过氧化等重要作用。目前MT在心肌、骨骼肌、脊髓、脑等组织缺血再灌注损伤中的实验研究已显示MT有保护作用,但对MT在肝缺血再灌注损伤中的作用报道较少。本课题将MT用于大鼠的缺血再灌注损伤,对MT在大鼠肝缺血再灌注损伤中的作用及其机理进行了研究。首先,建立大鼠肝缺血再灌注模型,通过检测血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总胆红素(T-BIL)的水平和肝脏病理形态学的变化,观察MT在大鼠肝缺血再灌注损伤中的作用。其次,制备肝匀浆,检测肝组织中丙二醛(MDA)和谷胱甘肽(GSH)的含量、SOD的活力以及肝抑制羟自由基的能力。最后,提取肝组织RNA并进行反转录,采用荧光实时定量PCR测定肝组织中核转录因子-KappaB(NF-κB)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和细胞间粘附分子-1(ICAM-1)mRNA的水平。结果显示:(1)MT能抑制血清中ALT、AST和T-BIL水平的升高,降低肝损伤,在大鼠肝缺血再灌注中起保护作用。(2)MT可降低脂质过氧化产物MDA的含量,提高SOD的活力和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)的底物GSH的含量,增强肝抑制羟自由基的能力,降低肝缺血再灌注中的氧化损伤,从而减轻肝细胞损伤。(3)MT可降低NF-κB、TNF-α和ICAM-1mRNA的水平,由此推测MT可能通过降低促炎因子的产生和释放,减低炎性反应的产生,从而减轻大鼠肝脏缺血再灌注损伤。