急性肺栓塞大鼠肝细胞生长因子的变化

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目的本实验采用自体血栓回输法建立急性肺栓塞(acute pulmonary embolism APE)大鼠模型,固相夹心酶联免疫吸附法(ELISA)检测血浆中肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)含量,免疫组化法观察HGF在肺组织中的表达水平,通过检测肺栓塞后血浆HGF含量及肺组织中HGF的表达水平,观察HGF变化趋势,研究HGF对于肺栓塞的诊断价值,并初步探讨HGF在肺栓塞时升高的机制。方法32只健康成年SD大鼠(雌雄不限)随机分为2组:血浆HGF检测组(16只)和组织HGF检测组(16只)。每组又可分为对照组和实验组各8只大鼠。实验组即模型组,采用自体血栓回输法建立肺栓塞模型,在无菌条件下断尾取血1 mL,置于无菌导管中,室温下静置25~30 min,70℃水浴10 min,形成牢固血栓。在超声下将4F鞘管扩张管插入右心房或接近右心房的下腔静脉处,将预制栓子通过鞘管扩张管分次注入,直至大鼠出现呼吸浅快、躁动不安、喘憋、口唇及耳朵发绀等缺氧症状,心率较术前增加30次/min左右,提示造模成功,停止继续注入。对照组即假手术组,以与自体血栓等量生理盐水注入。血浆HGF检测组,在造模成功后0、1、6、12、24、48小时,六个时间点采集血样,ELISA法检测血浆HGF含量,并观察HGF的变化趋势;组织HGF检测组,在造模成功后12h处死大鼠,取肺、肝和肠组织,10%福尔马林固定,石蜡包埋后,行HE染色,镜下寻找栓子,验证造模成功,并用免疫组化法检测HGF蛋白在肺组织中的表达,同时观察肝和肠组织有无血栓。结果血浆实验组和组织实验组分别有1只和2只大鼠死亡,其他实验组大鼠肺动脉可见栓子,肝、肠组织未发现梗死现象,显示造模成功。实验组血浆HGF在造模后1 h开始升高,12 h达到高峰,48 h后下降至接近正常,实验组与对照组比较,造模1、6、12和24h血浆HGF差异有统计学意义(P<0.05);急性肺栓塞肺组织中HGF蛋白表达以阳性面积率表示,组织对照组为(0.88±0.26)×10-2,组织实验组为(3.49±0.56)×10-2,两者差异有统计学意义(P<0.01)。结论急性肺栓塞时HGF明显升高,并于12h左右达到高峰;HGF有望作为一种新的生物学标记物用于急性肺栓塞早期诊断。
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