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苦荞(agopyrum tataricum (L.) Gaertn)是一种蓼科荞麦属双子叶植物。苦荞茶是将其果实苦荞米经过筛选、烘烤等加工工序制作成的天然饮品。目前研究发现,苦荞茶具有良好的生理保健功效,如增强机体免疫力、降血糖、降血脂、抗氧化、抗癌等。针对苦荞茶黄酮、蛋白质等的研究,已经有大量的报道,而苦荞茶多糖的研究报告确很少见。为了更好的阐明苦荞茶生理保健的机理,本文针对苦荞茶多糖(tartary buckwheat tea polysaccharide, TBTP)进行研究。首先,优化苦荞茶多糖的超声波辅助提取工艺；然后,利用纤维素柱和葡聚糖凝胶柱纯化苦荞茶多糖粗提物并对其单糖组成进行HPLC分析；最后,以HUVECs(人脐静脉内皮细胞)为细胞模型,研究苦荞茶多糖对HG/HF(高糖/高脂,25 mM DMEM+500μM棕榈酸)诱导损伤的HUVECs田胞的保护效应。通过本实验获得的主要数据、结果,如下：(1)提取次数、超声波功率、液固比、温度和时间单因素实验的结果表明,随着单因素参数值的变化,相对应的苦荞茶多糖提取率也在发生着明显改变,因此,各单因素与苦荞茶多糖的提取率都具有相关性。应用中心组合实验方法,对提取工艺进行优化得到,提取3次、超声波功率300 W,液固比24.7：1、温度59.2℃、时间74.3 min时,苦荞茶多糖的提取率达到最大值8.26%。对获得的苦荞茶多糖,应用柱层析法对其分离和纯化。苦荞茶多糖通过DEAE-52纤维素柱和G-100葡聚糖凝胶柱,两柱分离和纯化,层析得到三种均一多糖,并分别命名为TBTP-1、TBTP-2和TBTP-3。通过HPLC对单糖组成、配比分析,结果表明：TBTP单糖组成主要为D-甘露糖、D-核糖、L-鼠李糖、D-葡糖醛酸、D-半乳糖醛酸、D-葡萄糖、D-木糖、D-半乳糖、L-阿拉伯糖,且相对摩尔百分比分别为4.47%、3.09%、8.55%、2.52%、6.28%、22.08%、12.49%、26.88%、13.64%。样品TBTP-1的单糖组成主要为D-甘露糖、L-鼠李糖、D-半乳糖醛酸、D-葡萄糖、D-木糖、D-半乳糖、L-阿拉伯糖,相对摩尔百分比分别为1.66%、2.31%、0.60%、75.43%、1.96%、6.08%、11.97%。样品TBTP-2的单糖组成主要为D-甘露糖、L-鼠李糖、D-葡糖醛酸、D-半乳糖醛酸、D-葡萄糖、D-木糖、D-半乳糖、L-阿拉伯糖,相对摩尔百分比分别为4.66%、4.39%、2.33%、9.51%、1.61%、25.86%、35.97%、15.67%。样品TBTP-3的单糖组成主要为D-甘露糖、L-鼠李糖、D-葡糖醛酸、D-半乳糖醛酸、D-葡萄糖、D-木糖、D-半乳糖、L-阿拉伯糖,相对摩尔百分比分别为7.86%、8.35%、4.41%、3.97%、3.74%、20.07%、46.53%、5.07%。(2)细胞水平实验结果表明：]BTP作用后,HG/HF+TBTP组细胞存活率比HG/HF组明显升高(P<0.01),且单独的TBTP处理组与正常组相比HUVECs细胞的增殖变化相比没有显著性差异；HG/HF诱导的HUVECs细胞凋亡状况,在TBTP处理后被明显改善,且该过程中促凋亡蛋白Bax表达受到明显抑制,凋亡抑制因子Bcl-2蛋白表达显著性升高,Bcl-2/Bax比例值虽然低于正常对照组,但是与HG/HF组相比明显升高(P＜0.01), Cleaved Caspase-3的表达也明显受到抑制。而且,TBTP不影响正常HUVECs细胞ROS含量,但是,对于HG/HF诱导的HUVECs细胞ROS水平的异常升高,TBTP对其有显著的降低效果,说明,TBTP可能通过调节细胞内ROS的含量对HG/HF诱导的]HUVECs细胞凋亡发挥抑制作用。综上所述,超声波辅助可显著提高苦荞茶多糖的提取率,TBTP、TBTP-1、 TBTP-2和TBTP-3不仅在单糖组成上有差异,而且各单糖的组成配比也不相同；TBTP可能通过介导ROS的含量对HG/HF诱导的HUVECs细胞凋亡发挥抑制作用。以上研究发现可为植物多糖以及苦荞茶的开发、推广应用提供一定的理论支持。