目的:观察“形神共养”干预方式对衰老小鼠空间记忆能力、海马区神经元及线粒体形态结构的影响,探讨其通过调控调节线粒体自噬延缓衰老的相关机制。方法:将48只雌性18月龄SP F级C57BL/6小鼠按照随机数字表法分为衰老对照组、衰老“形养”组、衰老“神养”组及衰老“形神共养”组(n=12);将12只雌性3月龄SPF级C57BL/6小鼠作为青年对照组。青年对照组及衰老对照组小鼠进行标准环境饲养;衰老“形养”、“神养”、“形神共养”组进行相应的跑台训练、“神养”环境干预、跑台训练结合“神养”环境干预,每周5次,共8周。采用Morris水迷宫检测小鼠空间记忆能力;HE染色法观察小鼠海马CA1区病理变化;透射电子显微镜观察小鼠海马CA1区神经细胞超微结构及线粒体形态变化;Western Bl ot检测小鼠海马Parkin、LC3及p62蛋白表达。采用Morris水迷宫检测小鼠空间记忆能力;HE染色法观察小鼠海马CA1区病理变化;透射电子显微镜观察小鼠海马CA1区细胞超微结构及线粒体形态变化;Western Bl ot检测小鼠海马Parkin、LC3及p62蛋白表达。结果:1、各组小鼠空间记忆能力:(1)定位航行实验:各组小鼠逃避潜伏期时间均逐渐缩短,下降幅度各有不同。与青年对照组相比,衰老对照组小鼠逃避潜伏期延长(P<0.05);衰老“形养”组、衰老“神养”组及衰老“形神共养”组逃避潜伏期均较衰老对照组明显缩短(P<0.05)。(2)空间探索实验:与青年对照组相比,衰老对照对照组小鼠第Ⅲ象限停留时间百分比缩短(P<0.05);与衰老对照组相比,衰老“形养”组、衰老“神养”组及衰老“形神共养”组小鼠第Ⅲ象限停留时间百分比增加(P<0.05),且衰老“形神共养”组小鼠第Ⅲ象限停留时间百分比高于衰老“形养”组与衰老“神养”组(P<0.05)。2、各组小鼠海马CA1区组织结构:青年对照组小鼠海马CA 1区神经元丰富,数量较多,排列整齐,结构致密,染色均匀明显;与青年对照组相比,衰老对照组小鼠海马CA1区的神经元数量显著减少,结构松散,排列紊乱。细胞形态异常,细胞核固缩,染色加深,细胞间质着色浅且不均匀;与衰老对照组相比,衰老“形神共养”组小鼠海马CA1区病理表现有显著改善。神经细胞数量明显增多,排列较为整齐,细胞结构较为完整,边界较清晰,细胞核固缩现象减少;衰老“形养组”小鼠海马CA1区病理表现有所改善,细胞形态较完整,结构正常,排列较整齐,神经元丢失减少;衰老“神养”组小鼠海马CA1区病理改变稍有改善,但效果不明显,神经元数量减少,神经元体积缩小,细胞间距增加,排列较为疏松。3、各组小鼠海马CA1区神经元超微结构及线粒体结构:青年对照组小鼠海马CA1区神经元形态正常,结构保持完整,可以观察到核仁、核膜,染色质分布均匀。线粒体结构完整。衰老对照组小鼠海马CA1区大部分神经细胞破损,结构不完整,细胞核形态改变,核膜不完整。线粒体数量减少,内容物流失,线粒体嵴断裂,线粒体出现浓染现象。衰老“形神共养”组小鼠海马CA1区大部分细胞结构较完整,线粒体状态较好,线粒体嵴完整。个别细胞内线粒体出现膜破损现象。衰老“形养”组小鼠海马CA1区部分神经元内线粒体破损溶解,内容物流失,少量线粒体出现浓染现象。衰老“神养”组小鼠海马CA1区神经元结构不同程度的破坏,部分细胞的线粒体内容物流失,线粒体嵴断裂。4、各组小鼠Parkin、LC3及p62蛋白的表达:青年对照组Parkin、LC3-Ⅱ、LC3-Ⅱ/Ⅰ及p62蛋白基础表达。与青年对照组相比,衰老对照组Parkin蛋白水平下降,LC3-Ⅱ、LC3-Ⅱ/Ⅰ及p62蛋白水平上升(P<0.05)。与衰老对照组相比,衰老“形养”组、衰老“神养”组、衰老“形神共养”组小鼠Parkin蛋白表达上调,LC3-Ⅱ、LC3-Ⅱ/Ⅰ及p62表达下调(P<0.05)。与衰老“形养”组、衰老“神养”组相比,衰老“形神共养”组Parkin表达上升(P<0.05),LC3-Ⅱ、LC3-Ⅱ/Ⅰ及p62表达下调(P<0.05)。结论:1.“形神共养”干预可以改善衰老小鼠空间记忆能力,同时改善小鼠海马CA1区组织结构及线粒体形态,且效果优于单一的“形养”或“神养”干预方式。2.“形神共养”干预可能通过上调Parkin蛋白的表达,同时下调LC3-Ⅱ、LC3-Ⅱ/Ⅰ及p62蛋白的表达,适度恢复线粒体自噬功能,起到延缓衰老的作用。