化学去细胞异体及异种神经移植相关免疫因素的实验研究

来源 :中国人民解放军军医进修学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jiangbaolin
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目的 通过对化学去细胞神经组织学和移植后的相关免疫学因素的研究证实经化学萃取的去细胞异体及异种神经用于周围神经缺损修复的可行性,为其临床应用提供实验根据。 材料和方法 在第一部分实验中,我们进行了化学去细胞神经移植物的制备,其中包括同种异体及异种神经的取材及化学萃取处理,然后对其进行组织学研究。我们在20只C57BL/6小鼠双侧坐骨神经上取直径0.3mm,长1..cm的40条神经,并在7只新西兰大白兔的双侧前臂尺神经上切取直径0.3mm,长1.5cm的38条尺神经,其中2条新鲜神经留作组织学研究的对照。将两组神经以Triton X-100和脱氧胆酸钠溶液进行去细胞化学萃取处理。处理后神经进行保存以作为第二部分实验的神经移植物并留下经去细胞处理过的新西兰大白兔神经2条进行组织学研究。随后对2条新鲜异种神经与经化学萃取处理的2条异种神经制作切片进行组织学观察,包括:HE染色、髓鞘染色、层粘连蛋白免疫组化染色及纤维素染色。 在第二部分实验中,在前面进行化学去细胞神经移植物的制备基础上,我们通过植入不同类型的小鼠同种异体和异种神经,观察移植后免疫排斥中脾脏T细胞的总数与亚群、部分相关淋巴因子等相关免疫因素的变化。192只BALB/c小鼠随机分成假手术组、新鲜自体神经移植组、新鲜同种异体神经移植组、新鲜异种神经移植组、化学去细胞同种异体神经移植组和化学去细胞异种神经移植组各32只。每组小鼠股部植入相应类型的神经。然后分别在神经植入术后3、7、14、28天把各组的8只小鼠取出脾脏、剪碎、磨匀、裂解、离心,对每组每只小鼠的淋巴
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