【摘 要】
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【目的】研究表面蛋白A1基因多态性频率分布,探讨其与新生儿支气管肺发育不良(BPD)相关性【方法】选择2008年7月至2010年10月同济医院接诊武汉汉族BPD患儿,满足入选条件共38
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【目的】研究表面蛋白A1基因多态性频率分布,探讨其与新生儿支气管肺发育不良(BPD)相关性【方法】选择2008年7月至2010年10月同济医院接诊武汉汉族BPD患儿,满足入选条件共38例,同期非呼吸系统疾病入院患儿55例为对照。两组均取静脉血2mL,EDTA-Na抗凝,用传统酚氯仿方法抽提DNA,无水乙醇沉淀干燥后溶解于TE中-20℃保存。SPA1与SPA2同源性极高,故应用巢式PCR(nested-PCR)与限制性酶切(RFLP)技术相结合。每一个样本需进行一次PCR,将PCR产物用双蒸水按1:99稀释后作为用nested-PCR的模板进行第二次PCR。将PCR结果取5μl于2﹪琼脂糖凝胶电泳。取PCR产物5μl分别加入适量的相应特异性内切酶。A219位点65℃水浴2小时,AA62、AA50、AA19位点37℃水浴过夜。酶消化产物10μl或15μl于8%或12﹪聚丙烯酰胺凝胶电泳分离,参照DNA分子量标准根据电泳条带判断基因型。【结果】BPD组和对照组AA219,AA62,AA50,AA19基因和基因型分布均符合Hardy-Weinberg平衡定律(P>0.05)。说明本实验人群均具有群体代表性。对各基因位点的基因型和等位基因频率分布进行比较显示BPD组和对照组之间AA50基因型分布(P=0.038)和等位基因频率(P=0.012)差异有统计学意义。AA219,AA62,AA19三个位点基因型分布和等位基因频率差异无统计学意义(P>0.05)。AA50 BPD组CC基因型明显低于对照组(7vs23,P<0.05),差异有统计学意义。【结论】SPA1上AA50位点基因多态性可能与新生儿支气管肺发育不良有关,CC基因型可能对BPD患病有保护作用。
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