土壤病原真菌的检测及土壤中真菌群落多样性的研究

被引量 : 0次 | 上传用户:luckkycaroll
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
枯萎病是一种严重的土传病害,在瓜类作物上发生较为严重,该病害由镰刀菌Fusarium oxysporum引起;而夏季草坪斑枯病是发生在草坪上的一种毁灭性土传病害,由病原真菌Magnaporthe poae Landschoot Jacson引起,这之前,该病害一直被误诊为是由镰刀菌或其它几种病原菌复合侵染所导致。传统的土壤中病原菌的检测鉴别不仅耗时长,效率和灵敏度低,而且经验性强,精准性差。建立快速的病原真菌检测方法,对科技人员早期发现病害,及时采取防控措施,有效控制病害具有重要的作用。目前常用的病害防治方法有生物防治、喷施杀菌剂、培育抗病品种、诱导抗病性等手段。土壤真菌是受残留在土壤环境中的杀菌剂、杀虫剂等化学物质影响最直接的群体之因此,本文采用实时荧光定量PCR和Macroarray检测技术,定量检测微生物有机肥和杀菌剂喷施后病原菌与土壤真菌的数量关系及行为特征,这对于今后运用该方法正确鉴别和区分这两种病原真菌引起的病害具有重要的意义。本文运用SYBR Green I荧光定量PCR和Macroarray技术对微生物有机肥BIO施用后的西瓜枯萎病根际和土体土壤中Fusarium oxysporum f.sp. niveum进行了快速检测和定量。结果表明SYBR GreenⅠ荧光定量PCR和Macroarray检测技术能够快速准确的运用于病原真菌的检测。在处理N++P+(营养钵和大盆钵均加微生物有机肥料)中,根际和土体土壤中尖孢镰刀菌数量减少最为明显;根际土壤中尖孢镰刀菌数量从对照处理(N-+P-)的8.89×105个拷贝、克土减少到3.28×103个拷贝/克土,该结果与Macroarray检测结果相一致。Macroarray杂交信号的强弱(即灰度值)与土壤中尖孢镰刀菌的数量之间存在着一定的正相关关系,表现为尖孢镰刀菌的数量越多,杂交信号越强。运用DGGE和克隆文库的方法对微生物有机肥料施用后西瓜枯萎病害根际和土体土壤中真菌群落结构变化进行了研究,结果表明:施用微生物有机肥不仅能够有效防控枯萎病的发生,而且还能够调控根际土壤微生物群落结构。根际土壤真菌多样性的变化趋势表现为:处理N-+P-(营养钵和大盆钵均不加微生物有机肥料)<处理N-+P+(营养钵不加,大盆钵加微生物有机肥料)<处理N++P-(营养钵加,大盆钵不加微生物有机肥料)<处理N++P+(营养钵和大盆钵均加入微生物有机肥料BIO),土体土壤中真菌多样性变化趋势与根际土壤相似,但是根际土壤中真菌多样性高于土体土壤。Macroarray和Taqman荧光定量PCR检测技术能够快速准确的检测夏季草坪斑枯病病原菌M.poae,而且该方法对于病原菌的检测灵敏度比传统的PCR方法高100倍。通过土壤稀释分离培养、基因克隆文库、DGGE、Illumina高通量测序技术对杀菌剂嘧菌酯和氯苯嘧啶醇使用后的夏季草坪斑枯病病害土壤真菌群落多样性进行研究,结果表明:施用嘧菌酯和氯苯嘧啶醇后,根际土壤的真菌群落多样性降低,而土体土壤中的真菌群落多样性增加。施用氯苯嘧啶醇对根际土壤中真菌群落多样性影响较嘧菌酯大。施用氯苯嘧啶醇后,草坪根际土壤中的真菌减少了7个科,152个属,200个真菌种类。本实验中运用土壤稀释分离培养法分离培养了21个基因型的23种真菌,分子克隆技术鉴定了30个具有代表性的真菌,而Illumina高通量测序技术产生了1040个基因型的2631个真菌种类。Illumina高通量测序技术所提供的信息量远远高于其它几种方法。
其他文献
随着改革开放的深入进行,我国的经济水平不断增长,城市居民的生活质量也在大幅度的提高,中国入世以来,人民的购买力不断上涨,居民购车已经变成非常普及的事情,私家车取代了过去自行
可扩展商业报告语言XBRL是美国会计师Charles Hoffman于1998年在可扩展标记语言XML的基础上提出的概念,这一概念将会计准则与计算机语言相结合,通过计算机对财务数据进行智能化
社区是中国城市化的标志,成为城市的一个符号,为居民提供服务,帮扶困难群体,为政府和居民搭建了桥梁。政府和市场不是万能的,有些服务无法提供,这个时候社区便能很好的解决这
目前,改变能源消费结构、提高新能源利用率已经成为世界各国发展的共识,新能源产业的发展也日益受到各个国家的重视。我国新能源产业的发展在近几年来可谓是突飞猛进,太阳能光伏
香港正式推出“资讯技巧”单元课程为了帮助学生学习和了解掌握资讯技巧的方法,提高学习效果,香港课程发展处正式推出“资讯技巧”单元课程。“资讯技巧”教材的主要内容由十个
随着媒体技术的日益成熟,社会化媒体开始登上历史的舞台。社会化媒体区别传统媒体的最大特征是“用户创造内容”,这为在传统媒体环境下只能被动接受信息的广大受众们提供了主动
脑胶质瘤是最常见的侵入性颅内恶性肿瘤,具有较高的发病率和死亡率。脑胶质瘤不同于其他肿瘤,因为其可以弥漫性地侵入周围的正常组织,传统的手术治疗不能完全切除胶质瘤。化
目的借鉴英国在社区护理体系建设方面的做法,有效提升我国的社区护理服务能力。方法通过分析英国社区护理在人才教育、分层管理、岗位职责等方面的做法与经验,与目前我国社区
目的:急性冠脉综合征(ACS)是危及患者生命的重要疾病之一,其发病率逐年上升。作为冠心病治疗的重要内容之一,调脂治疗在稳定及逆转易损斑块、改善心肌供血,改善患者症状及生活质量
英语教学是一个理论和实践相结合的活动过程。如何设计这个活动,如何选择活动内容,如何实施该活动这些问题的解决都依赖于教师的教学理念,而理念的背后是关于语言本质、语言