低强度超声增强顺铂对非小细胞肺癌抗癌效果及其机制的基础研究

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目的:旨在探讨低强度超声对顺铂(CDDP)治疗非小细胞肺癌抗癌效果的影响及其相关机制,为低强度超声在非小细胞肺癌上的运用提供理论依据。方法:1.将非小细胞肺癌A549细胞分为4组:空白组,顺铂单药治疗组,低强度超声治疗组及低强度超声联合顺铂治疗组,分别采用CCK-8法、流式细胞技术及DCFH-DA染色检测各组细胞在细胞活性、凋亡及氧自由基(ROS)产生方面的差异;2.采用microRNA芯片分析顺铂单药治疗组及低强度超声联合顺铂治疗组microRNA的表达谱变化,筛选显著高表达的microRNA进行后续研究;3.Rescue回复试验:通过下调microRNA芯片所筛选出的高表达micro RNA表达,再次分析、比较顺铂单药治疗组与低强度超声联合顺铂治疗组在细胞活性及凋亡方面的差异;4.通过生物信息学预测高表达microRNA的候选靶基因,并采用荧光素酶报告实验、qRT-PCR加以验证;5.抑制高表达microRNA,通过检测靶基因及其下游基因的表达来探讨可能的内在机制。结果:1.与空白组、顺铂单药治疗组及低强度超声治疗组相比,低强度超声联合顺铂能通过显著降低A549细胞活性(P<0.05),诱导细胞凋亡(P<0.05)及ROS产生(P<0.05)而增加顺铂的抗肿瘤作用;2.与顺铂单药治疗组相比,miR-124在低强度超声联合顺铂药治疗组显著高表达(P<0.01);3.下调miR-124表达水平后,低强度超声联合顺铂对A549细胞的抗肿瘤效果降低;4.miR-124靶向STAT3的3′-UTR;5.抑制mi R-124表达水平后,STAT3、p-STAT3、Bcl-2及Bcl-xL表达水平显著升高(P<0.05)。结论:1.低强度超声及顺铂均能通过降低A549细胞活性、诱导细胞凋亡及产生ROS,到达抗肿瘤作用;2.低强度超声联合顺铂对A549细胞的抗肿瘤效果具有协同效应;3.低强度超声通过miR-124/STAT3信号通路发挥增强顺铂的抗肿瘤作用。
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