阿特拉津和毒死蜱单一及联合暴露对鲤鱼肝鳃氧化应激与CYP450酶系影响的研究

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毒死蜱(Chlorpyrifos,CPF)和阿特拉津(Atrazine,ATR)分别是目前世界范围内应用较为广泛的有机磷类杀虫剂和三氯苯类除草剂,其主要是通过农业径流和灌溉用水等途径进入水生生态环境系统,由于其在水生生物体内的蓄积作用从而对鱼类等水生动物产生了一定的毒理学损伤作用。近些年,由于ATR和CPF使用量大、环境中存留期长、在水生环境中的检出率高并且对动物表现出一定的毒理学损伤作用等而广受关注。然而ATR和CPF对水生脊椎类动物的毒理学作用研究较少,为了更好的理解和分析ATR和CPF对水生脊椎动物的毒理学作用,本文以鲤鱼为受试动物,研究了ATR(4.28、42.8和428μg/L)和CPF(1.16、11.6和116μg/L)单一及ATR-CPF联合(1.13、11.3和113μg/L)亚慢性暴露对鲤鱼肝和鳃氧化损伤功能、组织结构、组织中蛋白质羰基(Protein carbonyl,PCO)含量、组织中DNA-蛋白质交联率(DNA-protein crosslinking, DPC)、细胞色素P450酶系(Cytochrome P450,CYP450)的影响。研究结果表明:1.ATR和CPF及ATR-CPF联合暴露均能导致鲤鱼肝病理组织结构和超微结构发生改变,其差异可为判断和分析ATR和CPF单一及ATR-CPF联合毒性效应提供了形态学依据。2.ATR和CPF及ATR-CPF联合暴露均能诱导鲤鱼肝和鳃组织中一氧化氮(Nitricoxide,NO)含量、PCO含量和诱导型一氧化氮合酶(Induced nitric oxide synthase,iNOS)活性、DPC指数升高,抑制羟自由基活性(Inhibit hydroxyl radical ability)以及过氧化物酶(Peroxidase,POD)活性降低,使机体清除自由基的能力降低,进而破坏机体的抗氧化防御系统,导致鲤鱼肝和鳃组织损伤并且影响机体正常的生理机能。3.通过对鳃组织微粒体CYP450酶系主要酶活性及CYP1s亚族基因表达情况的检测,结果显示ATR及ATR-CPF联合暴露对细胞色素P450和细胞色素b5的含量、NADPH-细胞色素C还原酶活性(NADPH cytochrome C reductase activity,NCR)、氨基比林-N-脱甲基酶(Amidopyrine-N-methyl enzyme,APND)、红霉素-N-脱甲基酶(Erythromycin-N-methylenzyme,ERND)和苯胺-4-羟化酶(Aniline hydroxylase,AH)的活性以及其相关基因CYP1s(CPY1A,CYP1B,CYP1C)的表达产生影响,CPF对CYP450酶系及CYP1s影响不明显。本研究表明,ATR和ATR-CPF联合暴露能干扰CYP450酶系的正常功能,加剧机体内的氧化损伤作用。综上所述,ATR和CPF单一及ATR-CPF联合亚慢性暴露,在相应暴露浓度和暴露时间的条件下,能引起肝和鳃组织损伤,诱导CYP450酶系活性、NO含量、PCO含量、DPC指数及iNOS活性升高,抑制POD活性及降低抑制羟自由基能力,使机体清除自由基的能力降低,诱导鲤鱼肝和鳃组织发生氧化应激,导致CYP1A、CYP1B、CYP1C mRNA表达升高,证明ATR和CPF对鲤鱼具有毒性作用。
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