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目的： 初步研究组蛋白H3 R117单ADP核糖基化修饰通过P300影响大肠癌细胞增殖及可能的机制。 方法： 1、组蛋白H3 R117单ADP核糖基化修饰通过P300对大肠癌细胞增殖的影响 （1）组蛋白H3 R117单ADP核糖基化修饰对大肠癌细胞增殖的影响 以大肠癌LOVO细胞组蛋白H3 R117位点突变为丙氨酸（H3R117A组）、突变为赖氨酸（H3R117K组）为研究对象，未转染LOVO细胞（Non-transfection group）、慢病毒空载体(Blank load transfection group)转染LOVO细胞为对照，CCK8检测细胞增殖，流式细胞术检测细胞周期情况；构建裸鼠移植瘤模型，观察移植瘤体积及重量。 （2）组蛋白H3 R117单ADP核糖基化修饰通过P300对大肠癌细胞增殖的影响 采用P300激动剂CTPB处理突变组（CTPB处理H3R117A组和CTPB处理H3R117K组），CCK8检测细胞增殖，流式细胞术检测细胞周期情况。 2、组蛋白H3 R117单ADP核糖基化通过P300影响大肠癌细胞增殖的机制 qRT-PCR检测各组细胞P300的mRNA水平。乙酰转移酶试剂盒检测各组细胞P300乙酰转移酶活性。Westernblotting检测各组细胞和移植瘤组织β-catenin、c-myc和cyclin D1蛋白表达水平。IP及CO-IP实验检测各组细胞和移植瘤组β-catenin的乙酰化水平以及 P300和β-catenin的相互作用。 结果： 1.组蛋白H3 R117单ADP核糖基化修饰通过P300对大肠癌细胞增殖的影响 （1）组蛋白H3 R117单ADP核糖基化修饰对大肠癌细胞增殖的影响 CCK8结果显示，突变组的细胞增殖抑制率较对照组的细胞增殖抑制率高（P＜0.05）,而对照组之间细胞增殖抑制率差异无统计学意义（P＞0.05），H3R117A组和H3R117K组之间细胞增殖抑制率差异也无统计学意义（P＞0.05）；流式细胞术检测细胞周期分布结果显示：突变组较对照组细胞相比，细胞处于G1期的比例增加，相应的增殖指数下降（P＜0.05)。而对照组之间增殖指数差异无统计学意义（P＞0.05），H3R117A组和H3R117K组之间细胞增殖指数差异也无统计学意义（P＞0.05）；裸鼠皮下移植瘤模型显示：突变组细胞裸鼠移植瘤较对照组细胞移植瘤的体积和重量均减小（P＜0.05）。而H3R117A组和H3R117K组之间裸鼠移植瘤的体积和重量无统计学差异（P＞0.05），同时对照组之间的裸鼠移植瘤的体积和重量也无统计学差异（P＞0.05）。 （2）组蛋白H3 R117单ADP核糖基化修饰通过P300对大肠癌细胞增殖的影响 CCK8结果显示，CTPB处理突变组与未经处理突变组比较，细胞增殖抑制率低（P＜0.05），同时CTPB处理的H3R117A组和H3R117K组之间细胞增殖抑制率也没有统计学差异（P＞0.05）。流式细胞术检测细胞周期分布结果显示：CTPB处理突变组较未经处理突变组相比，细胞处于G1期的比例下降，相应的增殖指数增加（P＜0.05）；而CTPB处理的 H3R117A组和 H3R117K组之间增殖指数也没有统计学差异（P＞0.05）。 2.组蛋白H3 R117单ADP核糖基化通过P300影响大肠癌细胞增殖的机制 （1）qRT-PCR结果显示：突变组LOVO细胞P300的mRNA表达水平较对照组低（P＜0.05）,而H3R117A组和 H3R117K组之间 P300的mRNA表达水平并没有统计学差异（P＞0.05），同时对照组之间P300的mRNA表达水平也没有统计学差异（P＞0.05）。 （2）乙酰转移酶活性检测试剂盒检测结果显示：突变组LOVO细胞P300的乙酰转移酶活性较对照组低（P＜0.05）,而H3R117A组和H3R117K组之间P300的乙酰转移酶活性并没有统计学差异（P＞0.05），同时，对照组之间P300的乙酰转移酶活性没有统计学差异（P＞0.05）。 （3）Western blotting实验结果显示： ①各组细胞中，突变组的β-catenin、c-myc和cyclin D1的蛋白表达水平较对照组低（P＜0.05）,而H3R117A组和H3R117K组之间β-catenin、c-myc和cyclin D1的蛋白表达水平没有统计学差异（P＞0.05），同时对照组之间β-catenin、c-myc和cyclin D1的蛋白表达水平也没有统计学差异（P＞0.05）；在各组移植瘤组织中，突变组的β-catenin、c-myc和cyclin D1的蛋白表达水平也较对照组低（P＜0.05）。 ②检测 CTPB处理的突变组细胞和未经过CTPB处理的突变组细胞蛋白表达水平结果显示，CTPB处理的突变组β-catenin、c-myc和cyclin D1的蛋白表达水平较未经CTPB处理的突变组高（P＜0.05）,而CTPB处理的H3R117A组和 H3R117K组之间β-catenin、c-myc和cyclin D1的蛋白表达水平没有统计学差异（P＞0.05）。 （4）IP以及CO-IP实验结果显示：在各组LOVO细胞和相应移植瘤组织核蛋白中，用β-catenin作为诱导蛋白去沉淀P300蛋白时发现H3R117单ADP核糖基化修饰位点突变后与β-catenin结合的P300减少P＜0.05）。同时，H3R117单ADP核糖基化修饰位点突变后β-catenin乙酰化水平也降低（P＜0.05） 结论： 1.组蛋白H3 R117单ADP核糖基化修饰可以通过P300促进大肠癌LOVO细胞增殖。 2.组蛋白H3 R117单ADP核糖基化通过P300促进大肠癌LOVO细胞增殖，可能与其一方面促进P300乙酰化活性，进而调节β-catenin的乙酰化水平，增加β-catenin的表达，上调c-myc和cyclindD1的表达有关；另一方面也与影响P300表达有关。