槐定碱缓释微球的制备与评价

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目的基于苦豆子主要有效成分之一——槐定碱对肺癌的疗效特点及其现有产品的不足,本研究采用简便的乳化-溶剂蒸发法制备聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)微球,并逐步优选处方工艺,以期获得形态圆整、粒径介于7~30μm之间、载药量包封率较高、缓释及肺靶向性能良好的槐定碱-PLGA微球。为载水溶性药物的微粒制剂、肺靶向长效制剂的设计与研发奠定基础。方法建立槐定碱高效液相(HPLC)含量测定方法,采用摇瓶法测定其在不同溶剂中的溶解度。应用乳化-溶剂蒸发法制备载槐定碱的PLGA缓释微球,以微球的成型性、粒径大小及其分布、载药量与包封率、体外释放度等为指标,系统考察内外相溶剂性质、添加剂、加药量、固含物浓度、相体积比、PLGA种类、外O相药物含量等因素对微球特性的影响;经单因素试验法逐步优化处方工艺,并对所得槐定碱微球进行体外表征与体内初步评价。结果1.所建立的槐定碱HPLC含量测定方法简便、准确、稳定,在20~400μg/ml浓度范围内线性关系良好,最低定量限为16.8μg/ml。槐定碱在水与二氯甲烷中极易溶解,在其他有机溶剂(乙酸乙酯、丙酮、二氧六环)中易溶;但在液体石蜡和橄榄油中略溶,在石油醚与正己烷中微溶。2.应用O/W乳化-溶剂蒸发法所得槐定碱微球形态均圆整。其中O相有机溶剂种类对微球形态大小无明显影响,但W相PVA浓度、p H或渗透压以及内W相或添加剂的引入均对微球形态大小有一定影响。然而上述处方工艺因素的改变均无法获得载药量与包封率较理想的槐定碱微球。3.应用O/O乳化-溶剂蒸发法可制得形态圆整的槐定碱微球。其中改变内外O相溶剂、固含物浓度、内外O相比例、理论载药量的改变,以及药物饱和外O相时,均显著影响微球形态大小;而十二酸和固化相的加入、PLGA种类的改变对微球形态大小影响不明显。O/O法所得微球载药量与包封率均较高,其中外O相或PLGA的改变对微球载药量与包封率有明显提高,当外O相被药物饱和时尤为显著,可达14.02±0.24%和70.12±1.18%。经单因素实验进一步优化所得最佳O/O法处方工艺为:以PLGA-COOH为载药材料、固含物浓度和理论载药量均为10%、以乙腈/二氯甲烷(9/1)为内O相,外O相加入槐定碱饱和。最佳处方所得微球圆整、粒度均匀,包封率可达66.98±0.48%,体外释放突释较低(4 h仅为16.56%),缓释特征明显。4.槐定碱微球圆整,表面光滑,粒度均匀,平均粒径为17.16±3.94μm,载药量为6.52±0.15%,包封率可达到65.24±1.47,可持续缓慢释药14 d。DSC、XRD及FTIR测定结果表明槐定碱被PLGA包载并高度分散于聚合物骨架中。与普通注射液相比,槐定碱微球经静脉注射后显示出明显的肺靶向特征。结论各处方工艺因素对载槐定碱缓释微球的性能均有不同程度的影响、且存在复杂的相互作用。采用乳化溶剂蒸发法制备槐定碱微球时,O/O法显著优于O/W法,所得微球圆整、粒径小而均匀,载药量与包封率较高,且具有良好的缓释及肺靶向效果。这将有助于提高槐定碱的抗肺癌疗效,具有重要的临床意义。
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