血管内皮生长因子C(VEGF-C)及其受体VEGFR-3的表达与肾细胞癌淋巴结转移的相关性研究

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目的:探讨肾细胞癌(Renal-cell Carcinoma,RCC)中血管内皮生长因子-C(Vascular Endothelial Growth Factor-C,VEGF-C)及其受体-3(Vascuiar Endotheiiai Growth Factor Receptor-3,VEGFR-3)的表达与肾细胞癌中淋巴管生成和淋巴结转移的关系,为肾癌的靶向治疗提供参考。方法:收集2012年8月至2013年12月于承德医学院附属医院确诊为单发肾细胞癌患者45例(实验组),其中男性25例,女性20例,年龄范围25~66岁,平均年龄53.35±8.36岁。术前按照诊疗指南常规行B超、CT等影像学检查,明确诊断为肾肿瘤并行肾根治性切除术。术后病理组织均证实为肾细胞癌,包括嫌色细胞癌1例,乳头状腺癌2例,透明细胞癌42例。其中有肾门周围淋巴结转移者14例,无淋巴结转移者31例。随机取10例患者距肿瘤边界5厘米以上的肾组织作为对照组。实验组和对照组切除的标本均分为两部分,一部分-80℃低温保存,用于mRNA水平的检测;一部分固定于4%多聚甲醛,用于免疫组织化学染色。聚合酶链式反应(PCR)方法研究45例肾癌组织和10例正常肾组织中VEGF-C mRNA水平表达的差异及其在淋巴转移组织及非淋巴转移组织中的表达差异。免疫组织化学方法检测VEGF-C/VEGFR-3在肾癌组织及正常肾组织中的表达情况,并计数淋巴管密度(Lymphatic Vessel Density,LVD)。SPSS-20.0软件用于统计分析,等级资料采用秩和检验,两组间计量资料比较采用t检验、计数资料采用卡方检验,P<0.05为有统计学意义。结果:1.VEGF-C A水平的表达PCR结果显示,肾细胞癌组织中VEGF-C mRNA水平的表达显著高于正常肾组织(分别为0.556±0.181和0.252±0.114)(P=0.001),并且高临床分期(Ⅲ+Ⅲ)患者显著高于低临床分期(Ⅰ+Ⅰ)组(分别为0.724±0.163和0.527±0.187,P=0.003),淋巴结转移组的表达水平显著高于无淋巴转移组(分别为0.683±0.164和0.542±0.191,P<0.01),但与患者年龄、性别及病理分级无关(均为P>0.05)。2.VEGF-C在正常肾组织及肾癌组织中的定位及表达免疫组织化学结果显示,肾细胞癌组织内VEGF-C的阳性率显著高于正常肾组织(分别为85%和30%,P<0.01),且VEGF-C在淋巴结转移组及高临床分期组的表达水平均均显著高于非淋巴结转移组和低临床分期组(分别为P<0.01和P<0.05),但是与组织的病理分级无关(P>0.05)。3.VEGFR-3在正常肾组织及肾癌组织中的定位及表达免疫组织化学结果显示,VEGFR-3定位于淋巴管内皮细胞的胞膜和胞质。肾细胞癌组织和正常肾组织的淋巴管密度分别为9.84±2.68和10.38±2.96,两者之间差异无统计学意义(P>0.05)。淋巴结转移组和高临床分期组的LVD(分别为12.05±2.18和11.69±2.37)均显著高于无淋巴结转移组及低临床分期组(分别为8.86±2.05和8.85±2.24)(P<0.01)。结论:正常肾组织中VEGF-C mRNA水平表达显著低于肾癌组织,且无淋巴结转移组显著低于淋巴结转移组(分别为P=0.001和P<0.01)。免疫组织化学结果证明正常肾组织内VEGF-C蛋白的表达阳性率显著低于肾癌组织(P<0.01),无淋巴结转移组显著低于淋巴结转移组(P<0.01),无淋巴结转移组的LVD同样显著低于淋巴结转移组(P<0.01),提示肾细胞癌和淋巴转移的发生与VEGF-C/VEGFR-3的高表达相关。
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