目的分析济南市第三人民医院住院科室病人中采集的各类标本检出的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌的流行病学特征与耐药性,为临床治疗中抗生素的规范合理选用提供科学指导与实验依据,降低耐药菌的发生机率,有效控制临床感染,同时减少医院感染的发生。方法收集2013年～2016年济南市第三人民医院所有科室住院病人的尿液、分泌物、痰液、渗出液、血液、穿刺引流液、脓液、咽拭子各类标本共计13714份,按《全国临床检验操作规程》进行细菌的初步接种培养与分离,然后利用梅里埃全自动微生物分析仪VITEK2-COMPACT对分离的细菌进行菌种鉴定,同时进行药敏分析试验,药敏试验结果判定标准按美国临床和实验室标准协会(CLSI)2009年判断标准,即依据各类药物最小抑菌浓度(MIC)值来分析菌株的敏感性。所有数据均用SAS9.1软件数据包进行处理。结果1.标本来源及分布(1)标本种类尿液5250份、痰液4614份、渗出液1114份、脓液891份、穿刺引流液636份、分泌物477份、血液477份、咽拭子255份共计13714份。(2)时间分布1～3月2947份;4～6月3208份;7～9月3871份;10～12月3688份。2.病原菌检出情况(1)病原菌检出13714份标本中共检出病原菌3880株,首先革兰阴性菌最多,共计2772株,占71.4%(2772/3880),其中前三位是大肠埃希菌(899株),肺炎克雷伯菌(461株)和铜绿假单胞菌(411株)。其次为革兰阳性菌770株,占19.8%(770/3380),以金黄色葡萄球菌(248株)较多。真菌338株,占8.7%(338/3880),以白假丝酵母菌为主。三类致病菌的构成比差别无统计学意义(P>0.05)。(2)主要致病菌主要致病菌构成比中,大肠埃希菌的构成比中最大,其次为肺炎克雷伯菌和铜绿假单胞菌,最小的为鲍曼不动杆菌。3.大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和铜绿假单胞菌感染的检出率及流行病学特征(1)大肠埃希菌大肠埃希菌的检出率为6.6%(899/13714),主要分布在呼吸科,占16.2%;痰液标本和尿液标本中检出最多,分别占42.2%和31.6%,其时间分布差别无统计学意义(P>0.05),7～9月份采集的标本中检出较多,近四年来的检出率分别为:2013年7.1%,2014年6.0%,2015年8.2%,2016年5.4%,检出率总体呈下降趋势。(2)肺炎克雷伯菌肺炎克雷伯菌的检出率为3.4%(461/13714),在重症医学科检出率较高,占18.0%,主要存在于痰液和尿液标本中,分别占54.7%和26.9%,其时间分布差别有统计学意义(P<0.05),7～9月检出较多,且近四年来检出率总体有所下降,分别为 2013 年 4.4%,2014 年 3.1%,2015 年 3.9%,2016 年 2.0%。(3)铜绿假单胞菌铜绿假单胞菌的检出率为3.0%(411/13714),科室分布中重症医学科为主,占28%;在痰液标本中的检出最多,检出率为37%;其时间分布差别有统计学意义(P<0.05),7～9月检出较多;近四年来的检出率分别为2013年4.1%,2014 年 3.1%,2015 年 2.8%,2016 年 2.2%。4.三种主要革兰阴性菌的耐药性分析(1)大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌这两种细菌的耐药率相对较低,对美罗培南、亚胺培南为代表的碳青霉烯类,三代头孢头孢替坦、哌拉西林他唑巴坦和氨基糖苷类阿米卡星的耐药率均<5%,其中肺炎克雷伯菌对美罗培南的耐药率为0,大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对二代头孢头孢呋辛钠的耐药率分别为100%和85%。(2)铜绿假单胞菌铜绿假单胞菌对青霉素类抗生素如氨苄西林、氨苄西林/舒巴坦的耐药率接近100%;对氨基糖苷类抗生素如阿米卡星耐药率为9%;对喹诺酮类抗生素如环丙沙星和左氧氟沙星的耐药率为27%,对碳青霉烯类抗生素如美罗培南和亚胺培南耐药率为20%和23%。结论2013年～2016年济南市第三人民医院住院病人中三种主要革兰阴性菌大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌检出较高,但呈逐年下降趋势,大肠埃希菌主要科室分布是呼吸科,以痰液和尿液标本检出最多;肺炎克雷伯菌和铜绿假单胞菌主要分布在重症医学科,以痰液标本中检出最多。这三种菌耐药性相对稳定,在临床用药时应以药敏试验为指导,应用耐药率相对较低的药物,同时应加强监控细菌耐药性力度,规范合理使用抗菌药物,以减少耐药菌株的产生,有效避免产生多重耐药菌株,降低医院感染的发生机率。