抗体技术经历了第一代抗体——血清多克隆抗体，第二代抗体——单克隆抗体，又发展到第三代抗体——基因工程抗体。基因工程抗体技术具有多方面的发展潜力，这一技术能够避开免疫而直接获得抗体，特别是人源抗体，这为人源抗体的生产及应用开辟了广阔的前景。 我们首先应用噬菌体抗体库技术筛选人源抗HBsAg噬菌体抗体，获得了一株亲和力较高的人源抗HBsAg噬菌体，酶切分析发现其具有完整的重链基因，但轻链缺失。利用全自动测序仪测定了其重链基因序列，经分析说明获得的人源抗HBsAg噬菌体重链基因可变区（VH）属于人VHⅠ亚群。并用ELISA及竞争抑制试验测定了其活性及特异性，证实此抗体片段仍具有较好的抗原结合活性和特异性。为了提高抗体的亲和力，我们进行了链替换试验：将PCR扩增的人抗体轻链基因，插至已克隆有人源抗乙肝表面抗原（HBsAg）抗体重链Fd基因的噬菌粒中，构建成轻链替换文库，经亲和淘洗，从该文库中筛选出了与重链Fd基因相匹配的轻链基因。链替换后，噬菌体抗体（phab）的ELISA光吸收值（A）从0.72±0.02提高到最高为1.24±0.10，说明其亲和力得到了提高。抑制实验证实，所筛选出来的phab具有抗HBsAg的特异性。序列分析了ELISA光吸收值（A）最高的5株phab的轻链基因，结果表明，3株K链的碱基序列基本一致，属VkⅢ亚群；2株λ链的基因序列相同，均属VλⅠ亚群。高效表达是基因工程抗体走向临床的关键问题之一，我们进一步将抗HBsAg抗体的轻链（L）和重链Fd段基因，分别克隆于pET20b质粒中并分别转化到大肠肝菌BL21（DE3），IPTG诱