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目的:了解miR-221和miR-222在急性髓细胞白血病(AML)骨髓有核细胞中的表达情况及与急性淋巴细胞白血病(ALL)和非白血病患者(NL)的表达差异,分析AML各亚型及其治疗前后的水平变化。以期在急性髓细胞白血病的诊断、治疗和预后上,寻找新的标准和靶点指标。
方法:收集42例AML、20例ALL和44例NL患者骨髓组织,分离有核细胞,抽提总RNA；采用茎环SYBR Green I Realtime RT-PCR检测AML、ALL及NL患者骨髓有核细胞中miR-221和miR-222的表达；采用Mann-Whitney U检验(两组)和Kruskal-Wallis H检验(多组)分析比较miR-221和miR-222的表达水平及其miR-221/miR-222的比值在AML组与其他两组之间的差异关系,同时分析比较这两种miRNAs在AML各亚型和化疗前后的表达水平及其变化。
结果:
1.用茎环Realtime RT-PCR方法检测miR-221和miR-222表达的敏感性和特异性良好。
2.miR-221和miR-222在AML组表达的中位数236.8和148.68；分别与ALL组骨髓中的表达中位数44.63和52.32比较,有显著性差异(P均为0.006)；而miR-221/222表达比值分别为1.56和1.71,两者未见明显差异(P=0.759)。
3.miR-221和miR-222在NL组(特发性血小板减少性紫癜、原发性血小板增多症、再生障碍性贫血及骨髓增生异常综合症)骨髓有核细胞中的表达及miR-221/222表达比值未见统计学差异(P＞0.05)。比较AML初诊患者与NL组骨髓有核细胞miR-221和miR-222表达发现,两者均存在显著差异,AML初诊患者和NL患者miR-221表达中位数分别685.28和84.94；miR-222表达的中位数分别为550.97和138.70,P值均为0。
4.miR-221和miR-222在M3型、M4型及M5型AML患者的骨髓有核细胞表达水平上这三型存在差异。miR-221和miR-222在M5表达最高。但这种差异未见显著的统计学意义,P值分别为0.166和0.518。(其余亚型因标本量少,未加入统计分析)
5.AML患者化疗前后骨髓标本miR-221和miR-222的表达存在显著性差异,P值分别为0和0.003。与化疗前比较,在AML患者化疗后原本高表达的这两种miRNAs降低到与非白血病相似水平。
结论:
1.与ALL及NL患者比较,miR-221和miR-222在AML患者的骨髓有核细胞中表达升高。
2.成簇分布的miR-221和miR-222在AML、ALL及NL表达丰度均较一致,miR-221/miR-222比值约在1.5,miR-221/miR-222比值在AML、ALL及NL骨髓有核细胞中表达未见明显差异
3.miR-221和miR-222表达在M3、M4及M5三种AML存在差异,但此差异无统计学意义。
4.化疗后miR-22l和miR-222表达下调。
5.提示miR-221和miR-222有可能在为AML的诊段()治疗和预后上,提供一个新的标准和靶点指标。