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目的:建立增生性玻璃体视网膜病变(PVR)的动物模型,检测补体C4b及甲状腺素转运蛋白(TTR)在玻璃体液中的变化,进一步验证前期蛋白质组学的研究结果。
方法:采用“玻璃体腔内注射体外培养的兔视网膜色素上皮(RPE)细胞”法建立PVR动物模型。建模后4、7、14天检查眼底并进行眼底拍照。14天后取PVR模型眼及正常对照眼的玻璃体,标本取材后取上清液。酶联免疫吸附(ELISA)实验方法检测补体C4b及TTR在玻璃体中的浓度。使用SPSS12.0软件包对数据进行统计分析,补体C4b及TTR浓度以x±S表示,两组ELISA检测结果的均数比较采用配对样本t检验。
结果:兔原代RPE细胞培养早期生长活跃,胞核透明、胞浆含丰富的黑色素颗粒,角蛋白及S100免疫组化结果阳性。PVR模型眼的眼底有大量增殖膜形成,漏斗形,牵拉视网膜致血管变形扭曲。经ELISA方法检测,正常对照组玻璃体中补体C4b浓度及TTR浓度分别为20.18±1.97μg/ml、88.58±8.84μg/ml;PVR组玻璃体中补体C4b浓度及TTR浓度分别为38.1±5.79μg/ml、112.57±6..89μg/ml。PVR组玻璃体中的补体C4b和TTR浓度明显高于正常对照组,差异有统计学意义(补体C4b:t=11.54,TTR:t=9.24;P<0.01)。
结论:该PVR动物模型建模简便易行,成功率高,而且与人PVR病理过程较为接近,可用于PVR相关的基础研究。PVR组玻璃体与正常对照组在补体C4b和TTR的表达上存在差异,补体C4b和TTR的表达上调可能与PVR的发病机制有关,其功能有待进一步深入研究。